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Simple HPLC-UV method for the quantification of bupivacaine in human plasma with one step protein precipitation - 08/06/20

Dosage de la bupivacaïne dans le plasma humain par une méthode HPLC-UV avec déproteinisation en une seule étape

Doi : 10.1016/j.medpal.2020.01.005 
Hayat Ben-Saghroune a, , Hicham Sbai a, b, Mohammed Abdessadek c, Ahmed El attari d, Sanae Achour e, Abderrahim El Bouazzaoui a, f, Nabil Kanjaa a, f
a Laboratory of anesthesia-intensive care and emergency medicine, Medical Center for Biomedical and Translational Research, Faculty of Medicine and Pharmacy, University Sidi Mohamed Ben Abdellah, Fez, Morocco 
b Anaestesia and Critical Care in University Hospital of Tangier, Simulation Center Faculty of medicine, University Abdelmalek Essadi, Tangier, Morocco 
c Laboratory of Neuroendocrinology and Nutritional and Climatic Environment, Department of Biology, Faculty of Sciences, University of Sidi Mohammed Ben Abdellah, Fez, Morocco 
d Central Laboratory for Medical Analyzes, Toxicology Unit, Hassan II University Hospital Center, Fez, Morocco 
e Pharmaco-toxicology service, Biomedical and translational research laboratory, Faculty of Medicine and Pharmacy, University sidi mohammed ben abdellah, CHU HASSAN II, Fez, Morocco 
f Department of Anesthesiology and Intensive Care A4, University Hospital Hassan II, Fez, Morocco 

Corresponding author.

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Summary

This research paper revolves around the process of the quantification of bupivacaine in human plasma through the selection of a sensitive high performance liquid chromatography method. The extraction of bupivacaine and ropivacaïne as an internal standard from plasma was performed through the use of hexane along with iso-propylalcohol. After liquid-liquid extraction we moved straightforward to the process of the mobile phase in which we had a combination of acetonitrile and potassium dihydrogen phosphate (65:35, v/v). The separation was carried out on a reversed phase C18 column with UV-detector at 210 nm for bupivacaine and 230nm for the internal standard. This particular examination exhibited excellent linearity (r2=0.999) in peak response over the concentration range of 0.1–1.5μg/mL bupivacaine in human plasma. The mean absolute recoveries for 0.5 and 1.5μg/mL of bupivacaine in plasma using the present extraction procedure were 97.43% and 95.03%, respectively. The intra- and inter-day coefficients of variation in the plasma were less than 12% at the lowest, and less than 10% at other concentrations, and the percent error values were less than 6%. The method displayed a high caliber of sensitivity and selectivity for therapeutic monitoring concentrations of bupivacaine in human plasma.

Il testo completo di questo articolo è disponibile in PDF.

Résumé

Cet article de recherche s’articule autour du processus de quantification de la bupivacaïne dans le plasma humain à l’aide d’une méthode chromatographie liquide à haute performance. L’extraction de la bupivacaïne et de la ropivacaïne comme étalon interne à partir du plasma a été réalisée en utilisant de l’hexane avec de l’alcool isopropylique. Après l’extraction liquide-liquide, nous sommes passés directement au processus de préparation de la phase mobile qui est constituée par un mélange d’acétonitrile et de dihydrogénophosphate de potassium (65/35, v/v). La séparation a été effectuée sur une colonne C18 en phase inversée avec un détecteur UV à 210nm pour la bupivacaïne et 230nm pour l’étalon interne. Cette mise au point particulier a montré une excellente linéarité (r2=0,999) en réponse maximale sur la plage de concentration de 0,1–1,5μg/mL de chlorhydrate de bupivacaïne dans le plasma humain. Les taux de récupération absolus moyens pour 0,5 et 1,5μg/mL de chlorhydrate de bupivacaïne dans le plasma au moyen par le biais de mode d’extraction étaient respectivement de 97,43 % et 95,03 %. Les coefficients de variation dans le plasma intra et inter jours étaient inférieurs à 12 % aux valeurs les plus basses et inférieurs à 10 % aux autres concentrations, et les valeurs d’erreur en pourcentage étaient inférieures à 6 %. La méthode a montré une sensibilité et une sélectivité élevées pour le suivi thérapeutique des concentrations de bupivacaïne dans le plasma humain.

Il testo completo di questo articolo è disponibile in PDF.

Keywords : Bupivacaine, Therapeutic monitoring, Plasma, Chromatography, Ultraviolet

Mots clés : Bupivacaïne, Suivi thérapeutique, Plasma, Chromatographie, Ultraviolet


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