Le diagnostic biologique d’hyperplasie congénitale des surrénales (HCS) repose sur l’augmentation, souvent après test au synacthène, de la concentration sérique de 17-hydroxyprogestérone (17OHP) pour les déficits en 21-hydroxylase et du 11-désoxycortisol (11DC) pour les déficits en 11-βhydroxylase. L’interprétation du résultat fait intervenir le 95^e percentile des valeurs de référence obtenues dans une population contrôle. Ces valeurs sont historiquement établies par immunodosage. Nous proposons de les déterminer par spectrométrie de masse (LCMS). Les résultats des tests au synacthène de 102 femmes ont été repris rétrospectivement : pour 92 d’entre elles (21 [14 ;62]ans, médiane [5^e ;95^e] percentiles) les diagnostics de HCS et d’insuffisance surrénalienne ont été écartés. Pour 10 autres (31[17 ;46]ans) l’HCS est confirmée ou fortement suspectée. Les valeurs du cortisol sérique (_irF) ont été obtenues par immunodosage, celles de la _ms17OHP et _ms11DC et des autres stéroïdes par LCMS. À T0min et T60min, les concentrations de _ms11DC sont de 0,6 [0,2 ;3,4] & 2,2 [0,7 ;6,9] pour la population contrôle vs 1.0 [0,3 ;3,2] & 3,4 [0,8 ;8,6] nmol/L pour HCS (p>0,05). Celles de _ms17OHP sont de 1,9 [0,4 ;6,3] & 3,5 [1,7 ;9,9] vs 24,1 [14,1 ;38,3] & 95,1 [48,9 ;190,2] nmol/L (p<0,01). Les concentrations de _irF obtenues pour les 2 groupes sont significativement différentes. Celles de _msTestostérone, _msAndrostènedione et _msDéhydroandrostérone ne le sont pas. Les concentrations post-synacthène de _ms11DC trouvées dans notre population contrôle peuvent constituer des valeurs de référence pour le déficit en 11βhydroxylase. Le triple du 95^e percentile (ici 21 nmol/L) peut être proposé comme seuil de positivité pour le screening d’une large population.