Les organes issus de donneurs décédés après arrêt cardiaque (DDAC) sont plus sujets aux lésions d’ischémie-reperfusion (IR). La mise en place d’une CRN est une méthode de reconditionnement de ces organes mais le manque de données sur les mécanismes de ce reconditionnement en limite l’optimisation. Le but de cette étude est de décrire les processus de coagulation et d’inflammation dans un modèle préclinique de CRN.

Une CRN a été mise en place après 30min d’arrêt circulatoire. Les reins ont été reperfusés par la CRN pendant 0h (n=6), 2h (n=6), 4h (n=6) et 6h (n=6) puis prélevés. L’expression protéique de Tissu Factor (TF), de Protease Activated Receptor 2 (PAR-2), d’E-Selectin, de Vascular Cell Adhesion Molecule-1 (V-CAM1), de Monocyte Chemoattractive Protein-1 (MCP-1), d’InterCellular Adhésion Molecule-1 (I-CAM1) et de Tumor Necrosis Factor-alpha (TNF-α) a été quantifiée par Western Blot. L’expression en ARN de thrombomoduline (TM), de TF, PAR-1, PAR-2, E-Selectin, V-CAM1, de MCP-1, IL-1 B, IL-8, IL-6, IL-10 et de TNF-a a été quantifiée par RT-PCR. Le taux d’hémoglobine (Hb), la numération plaquettaire et les concentrations sériques de TF et de CD40 ligands ont été mesurées avant l’ischémie chaude (IC), à 0 h, 2 h, 4h et 6h de reperfusion. Pour chacun des temps, l’infiltrat de macrophages dans les tissus rénaux a été quantifié.

À partir de 4h, la concentration en Hb et la numération plaquettaire décroissent progressivement. Après les 30min d’IC, les concentrations en CD40L et en TF augmentent. Le niveau d’expression de TF augmente à partir de 2h. Le niveau d’expression de TM initialement effondré après la phase d’IC revient au niveau de base à partir de 2h. L’expression en ARN d’Il-6, MCP-1, IL-8 et IL-10 augmentent après 2h et TNF-α et MCP-1 n’augmentent qu’à partir de 4 h. L’expression des molécules d’adhérence (E-sélectin, VCAM-1 et ICAM-1) ainsi que l’infiltrat tissulaire en macrophage augmentent significativement après 4h. L’expression de PAR-2 augmente significativement après 6h.

La phase d’IC entraîne une activation de la coagulation, une uprégulation de PAR-2 et la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires qui augmente pendant la procédure. En parallèle la CRN permet de restaurer un niveau de base de l’expression génomique et protéomique de TM. De même, on observe l’uprégulation d’IL-10 aux propriétés anti-inflammatoires. À partir de 6h s’installent une anémie, une thrombopénie ainsi qu’une infiltration macrophagique des tissus rénaux. Dans notre modèle préclinique de DDAC avec CRN, celle-ci permet de mettre en jeu des mécanismes de régulation de la coagulation et de l’inflammation mais une durée supérieure à 6h semble délétère pour les futurs greffons rénaux. La compréhension des phénomènes mis en jeu lors d’une procédure de CRN permettrait d’améliorer cette prise en charge.