Évaluer le risque fongique lié à l’eau dans différents centres hospitaliers et préciser les conditions méthodologiques pour une standardisation des prélèvements ont été les objectifs de l’étude principale conduite entre février 2004 et mars 2005 dans 10 centres hospitaliers en France métropolitaine.

Pour évaluer ce paramètre, une étude préliminaire a permis d’optimiser l’analyse mycologique de l’eau. Nous avons employé les mêmes conditions opératoires que pour les analyses bactériologiques : filtration de l’eau et ensemencement de la membrane d’acétate de cellulose sur gélose. Des services hébergeant des malades à risque, dont les services d’hématologie, de transplantation d’organes, des brûlés, ont été choisis. L’eau et les surfaces pouvant s’y rapporter ont été étudiées au niveau de 98 points de prélèvements. Trois prélèvements de 1L d’eau (1^er jet, froide, chaude) et 2 à 3 prélèvements de surfaces (intérieur du robinet, du pommeau de douche, siphon) ont été effectués pour chaque point de prélèvement. Une fiche épidémiologique a permis d’obtenir des informations sur le lieu du prélèvement, le(s) traitement(s) de l’eau (chlore ou autre) ainsi que sa température.

Il existait une différence significative (p=0,039) en fonction des différents types d’eaux. Les eaux chaudes (≥50°C) étaient significativement moins colonisées que les autres : 4 % d’entres elles ont révélé la présence de champignons contre 52 % des eaux froides. Les eaux étaient, en général, faiblement colonisées sauf pour 2 centres où il existait une contamination générale du réseau (flore monomorphe à Exophiala sp et à Fusarium sp). Soixante-dix-neuf pour cent des prélèvements d’eau froide présentaient moins de 5UFC/L, tout en étant plus colonisés que l’eau chaude. Les Dématiés ont été retrouvés fréquemment, Aspergillus sp a été rarement isolé. Les prélèvements de surfaces liées à l’eau (en moyenne 15 UFC/prélèvement) étaient moins fréquemment positifs (13 %) que les prélèvements d’eau. Les siphons étaient plus souvent positifs que les autres surfaces (23 %), or les champignons isolés n’avaient pas la même répartition que dans l’eau. Les rapports avec la flore bactérienne et P. aeruginosa ont été envisagés ainsi que l’effet des différents traitements de l’eau.

La réglementation impose uniquement des contrôles bactériologiques de l’eau. En l’absence de seuil de contamination fongique de l’eau à partir duquel il existe un risque d’infection fongique invasive nosocomiale pour les patients, il est difficile d’imposer des contrôles systématiques. En cas de travaux et en cas d’enquête épidémiologique au cours d’une infection nosocomiale, lorsque les prélèvements d’air n’ont pas été concluants, des contrôles mycologiques de l’eau sont nécessaires.

The aims of this study were to assess the risk of fungal infections related to the water supply in several hospitals and to clarify the appropriate methodology in order to standardize the technical conditions of the controls and develop guidelines. It was conducted in 10 university hospital centers across the country from February 2004 through March 2005.

A preliminary study allowed us to optimize the mycological analysis. The study was conducted under the same conditions as for bacteriological controls: water filtration through a cellulose acetate membrane cultured on agar. Departments with the highest patient risk were selected, including hematology, organ transplantation, and burn units. We selected 98 sites and sampled both water and water-related surfaces at each: three one-liter water samples (the first flow, cold and hot water) and two or three surface samples (inside the tap, pommel of the shower and siphon). At each site, a form was filled to specify its location in the unit, any water treatment (chlorine or other), filtering, and temperature. Water from taps equipped with sterilized filtration was sampled without the filter.

There was a significant difference (p=0.039) in the number of positive cultures between the three types of water sampled: hot water (>50°C) was colonized less often than first flow or cold water. Only 4% of the hot-water samples had positive cultures, compared to the 52% of the cold-water samples. Except in two hospitals with generalized contamination of the water pipes (one with Exophiala spp and the other with Fusarium spp), colonization was usually slight. Cold water was more colonized than hot water, but 79% of the samples yielded fewer than 5CFU/L. Dematiaceous hyphomycetes were isolated; Aspergillus spp were rare. The number of CFU in surface samples (that is, biofilms) was higher (mean=15 CFU per sample) but surfaces were positive less often than water (13% compared with 43% of all water samples). Sampling from siphons was productive more often than from taps (23%), but the molds isolated differed from those in the related water. Relations to bacterial flora and P. aeruginosa were also studied, together with the effects of chemical treatment.

Current regulations require only bacteriological survey. The absence of knowledge about the threshold of contamination at which there is a risk of nosocomial invasive fungal infections makes it difficult to impose routine monitoring. Mycological surveys of water are required during hospital renovation, plumbing work, pipe maintenance and when air samples are negative during nosocomial infection investigations.