Una anemia hemolítica debe sospecharse en un paciente que presenta un síndrome anémico asociado a ictericia y/o a esplenomegalia. La hemólisis se confirma por el carácter regenerativo de la anemia y por el aumento de la bilirrubina libre sérica, asociada a una haptoglobina sérica baja o indetectable. El procedimiento diagnóstico frente a una anemia hemolítica, tras descartar una causa inmunitaria, responde a una estrategia rigurosa. El estudio del contexto puede orientar de inmediato hacia una causa tóxica o séptica, o al paludismo. En caso de hemólisis aguda, también hay que pensar en una hemólisis tóxica medicamentosa. Puede producirse a partir de un déficit enzimático preexistente o una hemoglobina inestable subyacente, o sin una anomalía eritrocítica genética. La anamnesis es fundamental para la búsqueda de una toma de medicamentos oxidantes y capaces de causar hemólisis en un paciente con déficit de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. La anomalía de una enzima de la vía de las pentosas o una inestabilidad de la hemoglobina se buscan después de que haya pasado el episodio hemolítico. Una hemólisis mecánica se sospecha en caso de trombocitopenia y se reconoce por la presencia de esquizocitos. Fuera de un contexto agudo, el diagnóstico etiológico se basa en el frotis de sangre, que puede ser muy orientador. Si el frotis de sangre es normal, la anamnesis puede orientar hacia una anomalía constitucional en caso de antecedente personal de accesos de ictericia, de esplenomegalia o de esplenectomía. En este estadio, en función de la orientación clínica, se recomienda la búsqueda de una esferocitosis por citometría o ectacitometría, de una hemoglobinuria paroxística nocturna por citometría de flujo y la determinación de enzimas eritrocíticas.