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Silencing of TRPC1 regulates store-operated calcium entry and proliferation in Huh7 hepatocellular carcinoma cells - 08/05/15

Doi : 10.1016/j.biopha.2015.02.024 
Cigdem Selli a, , Yasemin Erac a , Buket Kosova b , Esra S. Erdal c , Metiner Tosun a
a Department of Pharmacology, Faculty of Pharmacy, Ege University, 35040 Izmir, Turkey 
b Department of Medical Biology, Faculty of Medicine, Ege University, 35040 Izmir, Turkey 
c Department of Medical Biology and Genetics, Faculty of Medicine, Dokuz Eylul University, 35340 Izmir, Turkey 

Corresponding author. Department of Pharmacology, Faculty of Pharmacy, Ege University, 35040 Izmir, Turkey. Tel.: +90 232 388 5266; fax: +90 232 388 4687.

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Abstract

Purpose

Previously, we observed reciprocal changes in TRPC1 and TRPC6 expression levels in aging rat aorta and A7r5, rat embryonic vascular smooth muscle cells. Furthermore, downregulation of TRPC1 significantly elevated store-operated Ca2+ entry suggesting the regulatory role of TRPC1 in A7r5 cells. Since TRPC6 upregulation shown to be associated with cell proliferation, the purpose of our study was to investigate the functional consequences of TRPC1 ion channel downregulation by RNA interference in Huh7 human hepatocellular carcinoma cell line.

Methods

Huh7 cells used in quantitative gene and protein expression as well as in functional analyses. To determine mRNA and protein levels, quantitative real-time RT-PCR and western blot analyses were performed, respectively. In functional analyses, real-time changes in proliferation, migration and intracellular Ca2+ levels were monitored.

Results

In shTRPC1-transfected Huh7 cells, TRPC1 mRNA and protein levels significantly decreased whereas store-operated Ca2+ entry significantly elevated. TRPC1-silencing suppressed cell proliferation without affecting cell migration in real-time cellular analyses.

Conclusion

These results suggest that TRPC1 may take part both in regulation of store-operated Ca2+ entry and proliferation of hepatocellular carcinoma cells.

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Keywords : Calcium store depletion, Cell proliferation, Fura-2, TRP channels


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Vol 71

P. 194-200 - avril 2015 Retour au numéro
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