Comparaison de la croissance in vitro de follicules secondaires de souris, de leur taux de survie et des taux de maturation ovocytaire selon différentes méthodes de congélation.

Des follicules preantraux de souris prépubères ont été cryoconservés soit par congélation lente de l’ovaire entier (Ova Cong) ou isolement (Iso Cong), soit par vitrification dans un système fermé. Le groupe témoin était des follicules non congelés. Les quatre groupes de follicules, sélectionnés selon les mêmes critères, ont été cultivés parallèlement pendant 12jours. Les courbes de croissance ont été comparées ainsi que les taux de follicules survivants et d’ovocytes matures obtenus en fin de culture.

Les follicules des groupes Iso Cong et Ova Cong ont atteint en fin de culture un diamètre de 423,0±47,1μm et 450,3±15,7μm, respectivement, inférieurs à celui observé pour le groupe témoin (680,7±12,3μm) et un taux de survie de 6,21 % pour le groupe Iso Cong, de 53,41 % pour le groupe Ova Cong et de 83,77 % pour le témoin. Les taux d’ovocytes matures après mise en maturation sont respectivement de 44,4 % pour le groupe Iso Cong, de 44,7 % pour le groupe Ova Cong et de 90 % pour le témoin. Après culture des follicules vitrifiés, seul un follicule sur 171 s’est développé.

Cette étude montre que les follicules ovariens de souris peuvent croitre in vitro après cryoconservation mais que leurs tailles, taux de survie et de maturation ovocytaire sont inférieurs par rapport à ceux du groupe témoin.

Comparison of in vitro development, survival and oocyte maturation rates of mice preantral follicles frozen by various methods.

Cryopreservation of the germinal cells using the slow freezing method for entire ovary (Ova Cong) or isolated preantral follicles (Iso Cong) and vitrification in a closed system of isolated preantral follicles (Iso Vitr). Non-freezing follicles were considered as the control group. The four groups were simultaneous cultured for 12 days in a microdrop system. At each day of the culture, mean diameter was measured and at the end of the culture, follicular survival and mature oocyte rates were compared.

Iso Cong and Ova Cong follicles achieved a smaller diameter (423.0±47.1μm et 450.3±15.7μm, respectively) than control group (680.7±12.3μm) at the 12th day of culture. At the end of the culture 6.21 % of Iso Cong follicles, 53.41 % of Ova Cong follicles and 83,77 % of Control follicles were alive. Mature oocyte rates were similar for the cryopreserved groups, 44.4 % for Iso Cong group and 44.7 % for Ova Cong group, but smaller than the Control group with 90 % of mature oocytes. Only 1/171 of the Iso Vitr follicles survived to the culture.

This study shows that mice's ovarian follicles can grow in vitro after cryopreservation but their diameter, survival and oocytes maturation rates are smaller than in the control group.