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Systematic application of multiplex PCR enhances the detection of bacteria, parasites, and viruses in stool samples - 21/06/13

Doi : 10.1016/j.jinf.2013.04.009 
Gary N. McAuliffe a, , Trevor P. Anderson a, Mary Stevens a, Jacqui Adams a, Robyn Coleman a, Patalee Mahagamasekera a, Sheryl Young a, Tom Henderson b, Maria Hofmann d, Lance C. Jennings a, c, David R. Murdoch a, c
a Canterbury Health Laboratories, P O Box 151, Christchurch 8140, New Zealand 
b Medlab South, C/O P O Box 151, Christchurch 8140, New Zealand 
c University of Otago, Christchurch, New Zealand 
d Fast-Track Diagnostics, 38 Rue Hiehl Z.I Langweis, Junglinster 6131, Luxembourg 

Corresponding author. Microbiology Department, LabPlus, P O Box 110031, Auckland City Hospital, Auckland 1148, New Zealand. Tel.: +64 21 1382163; fax: +64 9 3078922.

Summary

Objectives

To determine whether systematic testing of faecal samples with a broad range multiplex PCR increases the diagnostic yield in patients with diarrhoea compared with conventional methods and a clinician initiated testing strategy.

Methods

1758 faecal samples from 1516 patients with diarrhoea submitted to two diagnostic laboratories were tested for viral, bacterial, and parasitic pathogens by Fast-Track Diagnostics multiplex real-time PCR kits and conventional diagnostic tests.

Results

Multiplex PCR detected pathogens in 530 samples (30%): adenovirus (51, 3%), astrovirus (95, 5%), norovirus (172, 10%), rotavirus (3, 0.2%), Campylobacter jejuni/coli (85, 5%), Salmonella spp. (22, 1%), Clostridium difficile (72, 4%), entero-haemorrhagic Escherichia coli (21, 1%), Cryptosporidium spp. (3, 0.2%), Entamoeba histolytica (1, 0.1%), and Giardia lamblia (59, 3%). In contrast, conventional testing detected a pathogen in 324 (18%) samples.

Conclusions

Using a systematic approach to the diagnosis of gastroenteritis improved diagnostic yield. This enhanced detection with PCR was achieved by a combination of improved detection of individual pathogens and detection of pathogens not requested or unable to be tested by conventional tests. This approach also allowed earlier identification for most pathogens and created a workflow which is likely to adapt well for many diagnostic laboratories.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Multiplex PCR, Faeces, Bacteria, Parasites, Viruses


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Vol 67 - N° 2

P. 122-129 - août 2013 Retour au numéro
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