Le stress oxydant semble jouer un rôle un rôle majeur dans le développement des complications vasculaires au cours du diabète. L'albumine plasmatique à travers ses groupements thiols, est le principal antioxydant extra cellulaire. Le methylglyoxal (MG) est un réactif dicarbonylé qui augmente au cours du diabète et réagit fortement avec les protéines par une réaction de glycation non enzymatique. Le but de ce travail a été d'étudier les effets du MG sur la capacité antioxydante de l'albumine.

De l'albumine bovine (BSA) a été incubée avec 1 mM de MG à 37°C pendant 7 jours. Les modifications physicochimiques de l'albumine ont été évaluées en mesurant les modifications d'autofluorescence de l'albumine en présence d'un quencher (l'acrylamide). La capacité antioxydante de l'albumine a été déterminée en mesurant les groupements thiols en utilisant le réactif d'Ellman mais également en mesurant sa capacité à protéger des cellules en culture (cellules HeLa) en présence de peroxyde d'hydrogène).

La BSA modifiée par le MG (MG-BSA) a présenté d'importantes modifications de conformation, une baisse de l'autofluorescence du tryptophane (30 %) et une baisse significative des groupements thiols (40 %). L'albumine modifiée par le MG a aussi présenté d'importantes modifications suite à des phénomènes d'oxydation et de perte de sa capacité antioxydante. Les modifications physicochimiques de l'albumine bovine par le MG étaient proches de celles observées sur de l'albumine isolée de patients diabétiques.

Nos résultats suggèrent que les effets délétères induits par le stress carbonyl au cours du diabète pourraient être aussi la conséquence de la perte de la capacité antioxydante de l'albumine suite à l'attaque par des composés dicarbonylés. Les conséquences biologiques de ces modifications doivent maintenant être explorées.

Oxidative stress seems to play a major role in diabetic vascular complication development. Plasma albumin, via its thiol groups, is the main extracellular antioxidant molecule. Methylglyoxal (MG) is a very reactive dicarbonyl compound increased in diabetes which strongly modifies proteins by non-enzymatic glycosylation. The aim of this work was to study if MG could modify albumin antioxidant capacity.

Bovine serum albumin was incubated with 1 mM MG at 37°C for 7 days (MG-BSA). Albumin physico-chemical changes were evaluated by tryptophan autofluorescence measurement in the presence or in the absence of a quencher (acrylamide). Albumin antioxidant capacity was determined by thiol measurement using Ellman's reagent as well as in a cellular system (HeLa cells stressed by H₂O₂.)

MG-BSA exhibited important modifications as shown by conformational changes, decreased tryptophan autofluorescence (30%) and significant thiol loss (40%). MG-BSA led to important modifications resulting in oxidation and loss of albumin antioxidant capacity. MG-BSA modifications were close to the one observed in albumin isolated from diabetic patients.

Our results suggest that deleterious effects induced by carbonyl stress in diabetes could also originate from a loss of albumin antioxidant capacity by dicarbonyl compound attack. The biological consequences of these findings have now to be investigated.