In order to detect low Sirolimus and Everolimus concentrations, a new liquid chromatography-tandem mass spectrometry was developed. It is a chlorobutane extraction from total EDTA blood samples. It is validated according to the recommendations of the Food and Drug Administration (FDA) in the range of 1 to 50μg/L. Limit of detection (LOD) and quantification (LOQ) are 0.5μg/L and 1μg/L, respectively. Inter-assay accuracy and imprecision respectively range from 98.5 to 119.3% and 2.9 to 18.2% for Sirolimus and from 93.4 to 118.7% and 4.8 to 10.2% for Everolimus. A correlation study performed on 50 patients between this method and immunological methods used in routine shows a negative bias of 1.5μg/L for Everolimus and 0.8μg/L for Sirolimus. The method described here being a LC-MS/MS method, sensitive, specific, fast and precise may replace the current immunological methods used in our laboratory.

Afin de pouvoir atteindre des concentrations toujours plus faibles d’immunosuppresseurs comme le Sirolimus et l’Everolimus, une méthode de dosage par chromatographie liquide avec détection par spectrométrie de masse en tandem (CL-SM/SM) a été développée. Il s’agit d’une extraction au chlorobutane réalisée sur des échantillons de sang total EDTA. Celle-ci a été validée selon les recommandations de la Food and Drug Administration (FDA) dans une gamme de mesure allant de 1 à 50μg/L. Elle est caractérisée par une limite de détection (LOD) de 0,5μg/L et par une limite de quantification (LOQ) de 1μg/L. L’exactitude et l’imprécision en interessai varient respectivement de 98,5 à 119,3 % et 2,9 à 18,2 % pour le Sirolimus et de 93,4 à 118,7 % et de 4,8 à 10,2 % pour l’Everolimus. Une étude de corrélation portant sur 50 échantillons de patients a été réalisée et montre un biais négatif moyen par rapport aux méthodes immunologiques de 1,5μg/L pour l’Everolimus et de 0,8μg/L pour le Sirolimus. Cette méthode, sensible, spécifique, rapide et précise a permis de remplacer les méthodes de dosages immunologiques anciennement utilisées dans notre laboratoire de routine.