P335 Rôle protecteur de l’Hème Oxygénase-1 sur les îlots pancréatiques in vitro - 10/04/12
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Résumé |
Introduction |
Les procédures d’isolement et le temps de culture des îlots pancréatiques génèrent un stress oxydant responsable de leur vulnérabilité in vitro. Ces procédures préimplantatoires pourraient participer à la perte précoce des îlots pancréatiques transplantés. L’Hème oxygénase 1 (HO-1), une enzyme responsable du catabolisme de l’hème, est connue pour ses effets anti-apoptotiques, anti-inflammatoires et anti-oxydantes. Le but de ce travail est d’évaluer le rôle protecteur que pourrait jouer l’HO-1 in vitro dans l’amélioration de la qualité des îlots pancréatiques.
Matériels et méthodes |
Des îlots pancréatiques de Rat Wistar étaient isolés et mis en culture durant 12,24 et 48 heures. La génération de ROS était déterminée par l’usage d’une sonde fluorescente de Dihydroéthidine. La présence anions superoxyde (O2-) et peroxyde d’hydrogène (H2O2) était évalué par l’usage respectif de MnTMPyP et de PEG-Catalase. Le profil d’activation du gène de l’HO-1 était analysé par qPCR. Les échantillons recueillis immédiatement après isolement sont utilisés comme témoin.
Résultats |
La quantité de transcrits d’HO-1 augmente significativement durant les premières 24h de culture et se stabilise à 48H. En effet, après 24h de culture et 48h de culture, la quantité de transcrits est respectivement 500 fois (p<0,001) et 430 fois (p<0,001) plus élevée par rapport au témoin.
La génération de ROS est maximale dans les échantillons témoins et diminue significativement après 48h de culture. En effet, l’intensité de fluorescence était de 79,23±6,55 après 48h de culture contre 100 ± 3,03 chez les échantillons témoins (p<0,05). La génération O2 – est constante, alors que celle d’H2O2 est croissante durant les 48h de culture.
Conclusion |
Ces résultats suggèrent que l’activation de l’HO-1 semble être à l’origine de la diminution de la génération des ROS. Ces données doivent être confirmées par une étude du profil d’expression de l’HO-1 par Western Blotting. Ces résultats préliminaires semblent confirmer l’intérêt de cibler la voie de l’HO-1 pour améliorer la qualité des îlots pancréatiques in vitro.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.
Vol 38 - N° S2
P. A109-A110 - mars 2012 Retour au numéro
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