Principe de l'amplification en chaîne par polymérase - 16/01/12
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La technique d'amplification en chaîne par polymérase (polymerase chain reaction [PCR]) permet l'amplification d'une séquence d'acide désoxyribonucléique (ADN). Elle emploie des amorces d'ADN qui s'hybrident spécifiquement à une cible. Une enzyme ADN polymérase permet de recopier l'ADN cible à partir de ces amorces. Cette étape, répétée une trentaine de fois, aboutit à une amplification exponentielle de la cible qui n'en devient que mieux détectable. La détection est réalisée a posteriori par les techniques classiques d'hybridation moléculaire employant des sondes spécifiques, ou en temps réel à l'aide de marqueurs fluorescents. L'utilisation d'une transcriptase inverse qui transforme l'acide ribonucléique (ARN) en ADN avant les cycles de PCR peut permettre l'amplification d'ARN (RT-PCR). Cette méthode mise au point en 1985 a révolutionné le diagnostic des maladies infectieuses mais aussi des maladies génétiques et des cancers.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Mots clés : PCR, Acides nucléiques, ADN polymérase, Transcriptase inverse, PCR multiplexe, PCR spécifique d'allèle, Nested PCR
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