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Production d'un réactif monoclonal anti-B humain pour la détection des groupes sanguins ABO - 13/03/07

Doi : 10.1016/j.immbio.2006.11.006 
A. Tissent a, b, , N. Habti a, F. Sadiq a, b, N. El Amrani b, N. Benchemsi a
a Laboratoire de génie génétique et cellulaire, faculté de médecine et de pharmacie, Casablanca, Maroc 
b Laboratoire de biologie et de physiologie cellulaire, faculté des sciences-II Ben-M'Sik, Casablanca, Maroc 

Auteur correspondant.

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Résumé

La majeure partie des anticorps monoclonaux sont d'origine murine. Ils sont obtenus par la technique des hybridomes. Cependant, en l'absence d'une animalerie, la technique de la transformation des lymphocytes humains par le virus d'Epstein-Barr (EBV) est une alternative. Le but de ce travail est de produire des anticorps monoclonaux humains permettant la détermination des groupes sanguins ABO par cette technique. Un prélèvement sanguin est réalisé chez une femme de groupe O rhésus négatif. Les lymphocytes obtenus à partir de ce prélèvement par séparation sur gradient de densité, sont transformés par l'EBV. Les lymphoblastoïdes sont stabilisés par fusion avec des cellules myélomateuses de souris P3X63Ag-8 selon la technique des hybridomes puis clonés par dilution limite. Un anticorps H04 monoclonal anti-B humain est ainsi sélectionné. Il reconnaît les groupes B, AB, B3 et Bx. La comparaison de sa réactivité à d'autres anticorps monoclonaux anti-B de référence ne montre aucune discordance. L'anticorps H04 peut être utilisé comme réactif pour la détermination des groupes sanguins ABO et l'étude des épitopes de l'antigène B.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Abstract

The major part of monoclonal antibodies has a murine origin. They are obtained by the murine hybridoma technology. However, in the absence of an animalery, the transformation technology of human B-lymphocytes by Epstein-Barr virus (EBV) can be an alternative. The aim of this study is to produce a human monoclonal antibodies use in the determination of ABO blood grouping. A sampling of blood was deducted from a woman whose her blood type was O rhesus negative. EBV transformed lymphocytes obtained by density-gradient separation. Lymphoblastoïde cells were consolidated by fusion with P3X63Ag-8 murine myeloma cells according to the hybridoma technology, then cloned by limiting dilutions. A H04 human monoclonal antibody anti-B was selected. It recognizes the B, AB, B3 and Bx erythrocytes. The comparison of its reactivity with other anti-B commercial antibodies didn't show any discordance. The H04 human monoclonal antibody can be used like a reagent for the determination of ABO blood types and the study of antigen B epitopes.

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Mots clés : Réactif monoclonal anti-B humain, Groupes sanguins ABO, Transformation par l'EBV

Keywords : Anti-B human monoclonal reagent, ABO blood grouping, Transformation by EBV


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Vol 22 - N° 1

P. 68-71 - février 2007 Retour au numéro
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