S'abonner

Leptospira DNA detection for the diagnosis of human leptospirosis - 17/08/11

Doi : 10.1016/j.jinf.2005.02.022 
Claudia de Abreu Fonseca a, Marta Maria Geraldes Teixeira b, Eliete Caló Romero c, Fátima Mitiko Tengan d, Marcos Vinícius da Silva e, Maria Aparecida Shikanai-Yasuda a, d,
a Laboratory of Medical Investigation in Immunology (LIM 48), Hospital das Clínicas (HC), School of Medicine of University of São Paulo (FMUSP), Brazil 
b Laboratory of Taxonomy and Molecular Phylogeny of Trypanosomatids, Department of Parasitology, Institute of Biomedical Sciences, USP, Brazil 
c Department of Medical Biology, Adolfo Lutz Institute, SP, Brazil 
d Department of Infectious and Parasitic Diseases, School of Medicine of University of São Paulo (FMUSP), Infectious and Parasitic Diseases Clinic, Hospital das Clínicas (HC), FMUSP, Brazil 
e Emilio Ribas Infectology Institute, SP, Brazil 

Corresponding author. Address: Infectious and Parasitic Diseases Clinic, School of Medicine of University of São Paulo, Hospital das Clínicas (HCFMUSP), Avenida Doutor Enéas de Carvalho Aguiar, 500 térreo, sala 4, CEP 05403-000 Cerqueira César, São Paulo, Brazil. Tel.: +55 11 3081 3451; fax: +55 11 3085 1755.

Summary

This study aims to analyse PCR applicability to the diagnosis of human leptospirosis and to compare the sensitivity of two primer pairs in urine and blood samples.

PCR with G1/G2 and LP1/LP2 primers was specific and able to detect 10pg of DNA by agarose gel and 1pg by hybridization. Twenty-one serovars, representing 20 serogroups of pathogenic leptospires, were amplified with G1/G2 primers. DNA from two non-pathogenic serovars, Andamana and Patoc, was not amplified. For hybridization, one probe employing DNA from most prevalent leptospires (serovars Icterohaemorrhagiae, Copenhageni, and Autumnalis) was chosen in accordance with the microagglutination titres in patient samples. It was observed that not all serovars hybridized with the PCR products of G1/G2 and LP1/LP2 primer amplification, suggesting heterogeneity in the sequence amplified by these primers.

G1/G2-primed amplifications of blood and/or urine samples were shown to be significantly more sensitive (57.6%) than the LP1/LP2 primers (33.3%), P=0.04, when positivity of patients is considered. When each primer pair and only urine samples were considered, PCR positivity was higher for G1/G2 primers than for LP1/LP2 (P=0.007). G1/G2 presented greater sensitivity in urine than in blood, and LP1/LP2 presented greater sensitivity in blood than in urine, although these differences were not statistically significant.

The positivity of PCR per patient using both primers in blood and/or urine samples was 63.6%, with 84.4% efficiency. PCR was useful for patients without microagglutination detectable antibodies, for whom it was able to diagnose nine out of 11 patients (81.8%).

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Leptospirosis, PCR, Microscopic agglutination test, Leptospira DNA


Plan


© 2005  The British Infection Society. Publié par Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés.
Ajouter à ma bibliothèque Retirer de ma bibliothèque Imprimer
Export

    Export citations

  • Fichier

  • Contenu

Vol 52 - N° 1

P. 15-22 - janvier 2006 Retour au numéro
Article précédent Article précédent
  • Outpatient prescription of oral antibiotics in a training hospital in Turkey: Trends in the last decade
  • Ismail Yasar Avci, Selim Kilic, Cengiz Han Acikel, Muharrem Ucar, Metin Hasde, Can Polat Eyigun, Alaadin Pahsa, Sadettin Cetiner
| Article suivant Article suivant
  • Lower limb cellulitis: features associated with length of hospital stay
  • S.C. Morpeth, S.T. Chambers, K. Gallagher, C. Frampton, A.D. Pithie

Bienvenue sur EM-consulte, la référence des professionnels de santé.
L’accès au texte intégral de cet article nécessite un abonnement.

Déjà abonné à cette revue ?

Mon compte


Plateformes Elsevier Masson

Déclaration CNIL

EM-CONSULTE.COM est déclaré à la CNIL, déclaration n° 1286925.

En application de la loi nº78-17 du 6 janvier 1978 relative à l'informatique, aux fichiers et aux libertés, vous disposez des droits d'opposition (art.26 de la loi), d'accès (art.34 à 38 de la loi), et de rectification (art.36 de la loi) des données vous concernant. Ainsi, vous pouvez exiger que soient rectifiées, complétées, clarifiées, mises à jour ou effacées les informations vous concernant qui sont inexactes, incomplètes, équivoques, périmées ou dont la collecte ou l'utilisation ou la conservation est interdite.
Les informations personnelles concernant les visiteurs de notre site, y compris leur identité, sont confidentielles.
Le responsable du site s'engage sur l'honneur à respecter les conditions légales de confidentialité applicables en France et à ne pas divulguer ces informations à des tiers.


Tout le contenu de ce site: Copyright © 2024 Elsevier, ses concédants de licence et ses contributeurs. Tout les droits sont réservés, y compris ceux relatifs à l'exploration de textes et de données, a la formation en IA et aux technologies similaires. Pour tout contenu en libre accès, les conditions de licence Creative Commons s'appliquent.