Recognition of coxsackievirus A by Enterovirus genus-specific immune and molecular markers in experimentally infected suckling mice - 01/01/05
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Abstract |
Objective. - Most of coxsackieviruses A (CV-A) are difficult to isolate in cell culture and are responsible for flask paralysis in suckling mice. The aim of the present work was to analyze the ability of immune and RT-PCR techniques to detect viral components of three different serotypes, CV-A6, CV-A13, and CV-A14, in skeletal muscles of experimentally infected suckling mice.
Material and methods. - The antigen detection was done by immunofluorescence technique on trypsinized muscular cells and by immunoperoxidase assay on frozen sections of skeletal muscle, using a monoclonal antibody directed towards a conserved epitope of the VP1 capsid protein among enteroviruses. The nested RT-PCR technique used primers located in the 5′ non coding region of viral RNA.
Results. - The group antigen was present in muscle cells of suckling mice infected by the three serotypes of CV-A which were assayed. Similarly, the muscle specimens were positive by nested RT-PCR. A kinetic study performed with CV-A13 and CV-A14 showed that the RT-PCR assay was positive as soon as 24 h after infection whereas the detection of VP1 antigen and symptoms of flask paralysis were observed only 48 and 72 h after infection, respectively.
Conclusion. - These results show that the tested serotypes of CV-A can be easily detected in muscle specimens of suckling mice by using antigenic and molecular techniques currently available for the diagnosis of enterovirus infections.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Résumé |
But de l'étude. - La plupart des coxsackievirus A (CV-A) sont difficilement cultivables sur systèmes cellulaires mais provoquent des paralysies flasques chez les souriceaux âgés de 48 heures. Ce travail analyse la capacité de techniques immunologiques et de RT-PCR à détecter les composants viraux dans les cellules du muscle squelettique de souriceaux nouveau-nés infectés expérimentalement par 3 sérotypes différents, CV-A6, CV-A13, et CV-A14.
Matériel et méthodes. - La détection d'antigène a été effectuée par technique d'immunoperoxydase sur coupes musculaires congelées, en utilisant un anticorps monoclonal dirigé contre un épitope de groupe de la protéine de capside VP1 des entérovirus.
Résultats. - L'antigène de groupe a été détecté dans les cellules musculaires de souriceaux infectées par les 3 sérotypes de CV-A. De même, les prélèvements musculaires étaient positifs par une technique de RT-PCR nichée utilisant des amorces communes au genre Enterovirus situées dans la région 5′ non codante du génome viral. Une étude cinétique réalisée avec CV-A13 et CV-A14 a montré que la détection par RT-PCR est positive dès 24 heures post infection alors que la détection de l'antigène VP1 et l'apparition des symptômes de paralysie flasque surviennent seulement à 48 et 72 heures post infection, respectivement.
Conclusion. - Ces résultats montrent que les sérotypes examinés de CV-A peuvent être facilement détectés dans des échantillons musculaires de souriceaux par des techniques antigéniques et moléculaires couramment utilisées pour le diagnostic des infections à entérovirus.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Keywords : Coxsackievirus A, Enterovirus, Suckling mice, RT-PCR, Antigen detection, Monoclonal antibody, Experimental infection
Mots clés : Coxsackievirus A, Entérovirus, Souriceau nouveau-né, RT-PCR, Anticorps monoclonal, Infection expérimentale, Détection d'antigène
Plan
Vol 53 - N° 6
P. 318-323 - juillet 2005 Retour au numéroBienvenue sur EM-consulte, la référence des professionnels de santé.
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