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Blood group genotyping by high-throughput DNA analysis: Application to the French panel of RBC reagents - 18/08/10

Doi : 10.1016/j.tracli.2010.05.007 
S. Kappler-Gratias a, b, c, T. Peyrard a, b, c, P. Rouger a, b, c, P.-Y. Le Pennec a, b, c, B.-N. Pham a, b, , c
a Institut national de la transfusion sanguine, 6, rue Alexandre-Cabanel, 75015 Paris, France 
b Centre national de référence sur les groupes sanguins, BP 79, 20, rue Bouvier, 75522 Paris cedex 11, France 
c Inserm U665, 20, rue Bouvier, 75011 Paris, France 

Corresponding author.

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Abstract

Background

The use of blood group genotyping for the prediction of antigen expression has been discussed in clinical transfusion settings, but much less for reagent red blood cells selection. In France, the Centre National de Référence pour les Groupes Sanguins (CNRGS) produces a reference panel of reagent red blood cells, mainly used for red cell antibody identification. The use of high-throughput DNA analysis has never been applied to blood donors whose red blood cells are used as reagents. The aim of this study was to compare the serological phenotype and that predicted from DNA analysis in such donors, and to determine the benefit of DNA analysis in reagent red blood cells selection strategy.

Study design and method

Red blood cells of 346 blood donors were typed with two different reagents for each antigen. The genotyping was performed by using HEA v1.2 BeadChips, BioArray Solutions, Immucor. The comparison between the serologically determined phenotype and that predicted from DNA analysis held on 8876 paired results obtained from 10 blood group systems and 25 antigens.

Results

A 99.95% concordance was observed. Four cases of discrepancy for RH, KEL, LU and DO blood group systems were analyzed. Genotyping precisions were of special interest for the Duffy blood group system.

Conclusion

Systematic DNA analysis brings important information on reagent red blood cells selection. It can be used at a routine level. Especially, the notion of “antigen of double dose” which is specified in several countries by government bodies should evolve regarding data obtained from DNA analysis. This should improve the quality of reagent red blood cells as first step for antibody identification.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Résumé

Contexte

L’intérêt du génotypage des systèmes de groupe sanguin dans le cadre transfusionnel est connu depuis plusieurs années. Les données concernant l’utilisation de ce génotypage pour sélectionner les hématies en tant que réactifs sont beaucoup moins nombreuses. En France, le Centre national de référence pour les groupes sanguins (CNRGS) produit le panel national de référence d’hématies tests servant à identifier les anticorps anti-érythrocytaires. Jusqu’à présent, le génotypage à haut débit n’a jamais été utilisé chez les donneurs de panel. Le but de cette étude était de comparer le phénotype classique à celui déduit de l’analyse génotypique chez les donneurs de panel, afin de préciser l’intérêt du génotypage dans la sélection des hématies tests.

Méthodes

Le phénotype érythrocytaire a été réalisé avec deux réactifs différents pour chaque antigène chez 346 donneurs de panel. Le génotypage a été effectué avec la technique de BioArray Solutions, HEA 1.2 BeadChips, Immucor. La comparaison a porté sur 8876 paires de résultats de phénotype classique versus phénotype déduit du génotypage, obtenus pour dix systèmes de groupe sanguin et 25 antigènes.

Résultats

Une concordance de 99,95 % a été observée. Nous avons noté quatre cas discordants portant respectivement sur les systèmes RH, KEL, LU et DO. Le génotypage du système Duffy s’est montré particulièrement intéressant.

Conclusion

L’analyse génotypique faite de façon systématique apporte des éléments importants pour la sélection des hématies tests composant le panel national de référence. Son utilisation peut être envisagée en routine. La notion de « double dose » antigénique demandée par les textes réglementaires au niveau de différents pays devrait tenir compte des données obtenues par génotypage. Cela permettrait d’améliorer la qualité des panels d’hématies tests utilisés pour l’identification des anticorps anti-érythrocytaires.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Blood group genotyping, Reagent red blood cells, High-throughput DNA analysis

Mots clés : Génotypage des systèmes de groupe sanguin, Panel d’hématies tests, Génotypage à haut débit


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Vol 17 - N° 3

P. 165-167 - septembre 2010 Retour au numéro
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