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La vitrification : technique d’avenir pour la cryoconservation ovarienne ? Bases physiques de cryobiologie, avantages et limites - 08/10/09

Doi : 10.1016/j.gyobfe.2009.07.017 
B. Courbière a, , b , A. Baudot c, d, C. Mazoyer e, f, B. Salle e, f, g, J. Lornage e, f, g
a Centre d’assistance médicale à la procréation, Service Pr-Gamerre, hôpital de la Conception, 147, boulevard Baille, 13005 Marseille, France 
b Université de la Méditerranée, Aix-Marseille-II, 58, boulevard Charles-Livon, 13007 Marseille, France 
c CNRS/UJF, département MCBT, institut Néel, BP 166, 38042 Grenoble cedex 09, France 
d Laboratoire de neurophysique cellulaire, université Paris-5, 45, rue des Saints-Pères, 75006 Paris, France 
e Inserm U846, H.-Kennedy, 18, avenue Doyen-Lépine, 69500 Bron, France 
f Université Claude-Bernard-Lyon-1, 43, boulevard du 11-Novembre, 69100 Villeurbanne, France 
g Service de médecine de la reproduction, hôpital Femme–Mère-Enfant, 59, boulevard Pinel, 69500 Bron, France 

Auteur correspondant.

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Résumé

La cryoconservation ovarienne est actuellement indiquée chez des patientes devant subir un traitement gonadotoxique, le plus souvent anticancéreux, qui va altérer la fertilité par destruction de la réserve ovarienne folliculaire. Bien qu’il y ait actuellement six naissances décrites dans le monde après cryoconservation ovarienne puis autogreffe, les techniques de cryoconservation ne sont pas consensuelles. La vitrification est un processus physique permettant la cryoconservation sans formation de cristaux de glace, par transformation d’une solution très concentrée en un état vitreux ou amorphe. Cette technique est actuellement en plein essor en biologie de la reproduction. En effet, avec les méthodes classiques de congélation, la formation de cristaux de glace au sein du tissu ovarien est systématique et peut entraîner des lésions cellulaires. C’est pourquoi de plus en plus d’équipes soulèvent la question de l’avantage théorique de la vitrification comme technique de cryoconservation du tissu ovarien. Nous avons eu pour objectifs de rappeler des bases physiques fondamentales de cryobiologie, indispensables à la compréhension de la vitrification. Nous avons aussi voulu à partir de notre expérience sur la vitrification de l’ovaire entier chez la brebis pointer les difficultés pratiques de réalisation de cette technique, et nous proposons un modèle d’évaluation et de validation par calorimétrie différentielle à balayage, applicable à tout protocole de vitrification.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Abstract

Ovarian cryopreservation is presently indicated in patients who undergo a gonadotoxic treatment, most commonly for anticancer procedures. These procedures can strongly alter fertility by damaging the follicular ovarian reserve. Although six human live births have been described in the world after ovarian tissue cryopreservation and autografting, the techniques of cryopreservation techniques are not consensual. Vitrification is a physical process that allows cryopreservation without formation of ice crystals, by transformation of a highly concentrated solution in a glassy or amorphous state. Vitrification is at present rapidly expanding in the biology of reproduction. With the classic methods of freezing, formation of ice crystals within the ovarian tissue is systematic and can entail cellular lesions. Which is why more and more teams question the theoretical advantage of the vitrification for ovarian cryopreservation. Our objective was to summarize the fundamental physical basis of cryobiology, necessary for an understanding of vitrification. From our experience, we also wanted to point out the practical difficulties of this technique, and we are proposing a model of evaluation and validation that uses differential scanning calorimetry, applicable to any protocol of vitrification.

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Mots clés : Cryoconservation ovarienne, Vitrification, Cryoprotecteur, Vitesse critique de refroidissement, Transition vitreuse, Réchauffement, Fracture

Keywords : Ovarian cryopreservation, Vitrification, Cryoprotectant, Critical cooling rate, Vitreous transition, Warming, Fracture


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Vol 37 - N° 10

P. 803-813 - octobre 2009 Retour au numéro
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