A cefotaxime-resistant Klebsiella pneumoniae ML4313 was obtained from a patient from intensive care unit of Military hospital in Tunisia. This strain was resistant to β-lactams, aminoglycosides, quinolones and phenicols, and tetracyclines. It was identified as producer of extended-spectrum β-lactamases (ESBL) by double-disk synergy test between amoxicillin–clavulanate and cefotaxime, ceftriaxone, ceftazidime and aztreonam. The ESBL was identified as CTX-M-28 by sequencing of PCR products and by isoelectric focusing. The ESBL resistance was transferred by a 50kb plasmid. CTX-M-28 is closely related to CTX-M-15. This is the first description of this enzyme in Tunisia.

Klebsiella pneumoniae ML4313 est une souche clinique hautement résistante au céfotaxime, isolée au service de réanimation à l’hôpital militaire de Tunis durant la période 2004. Cette souche est résistante aux β-lactamines à spectre étendu et à d’autres classes d’antibiotiques comme les quinolones, les aminosides, les macrolides, les tétracyclines et les phénicols. Cette souche a été identifiée comme productrice de β-lactamases à spectre étendu (BLSE) par test de synergie entre l’association amoxicilline–acide clavulanique et le céfotaxime, la ceftriaxone, le ceftazidime et l’azteréonam. Une β-lactamase focalisant à un pI supérieur à 8,2 a été détectée par isoéléctrofocalisation. Le gène codant pour cette enzyme est porté par un plasmide conjugatif de taille supérieur à 50kb. La détection du gène de résistance a été réalisée par PCR. Le produit d’amplification de taille 876 pb a été visualisé sur gel d’agarose 1 %, élué, purifié puis cloné dans le vecteur pTZ57R. Les amorces PUC/M13 forward et PUC/M13 reverse ont été utilisées, pour obtenir la séquence du gène. L’alignement de la séquence nucléotidique et protéique contre celle déposée dans les banques génomiques des β-lactamases (www.ncbi/) montre qu’il s’agit de CTX-M-28. C’est une BLSE directement reliée à CTX-M-15. C’est la première description de cette enzyme en Tunisie et en Afrique.