Entre septembre 2006 et mars 2008, recherche et identification par PCR de virus herpétiques sur biopsies d’œsophage prélevées par endoscopie pour 15 patients.

Les biopsies d’œsophage sont acheminées au laboratoire en sérum physiologique et congelées à −80°C pour la PCR, un fragment est réservé pour l’analyse anatomopathologique. Le prélèvement est décongelé puis recongelé en azote liquide (pour limiter les inhibiteurs) et broyé à l’état de poudre. L’extraction est ensuite réalisée selon le protocole classique préconisé dans la technique Herpès Consensus Générique^® (Argène) : cette trousse permet l’amplification consensus du génome des virus Herpès les plus fréquemment rencontrés en pathologie : HSV1, HSV2, CMV, VZV, EBV et HHV6. L’identification du virus impliqué est ensuite effectuée avec la trousse Hybridowell Herpès Identification (Argène), parallèlement à une migration en gel SDS des amplifias obtenus.

Parmi les 15 patients étudiés, le virus HSV1 a été identifié pour sept biopsies œsophagiennes, HHV6 et l’association HHV6/EBV pour deux patients, et une seule biopsie a donné un résultat ininterprétable. L’endoscopie et l’analyse anatomopathologique ont confirmé une œsophagite ulcérée avec des images cytopathogènes en faveur d’une infection virale pour six patients.

En l’absence d’inhibiteur, l’adaptation de la technique d’extraction pour des fragments de tissu de quelques millimètres et l’amplification par PCR nous ont permis de confirmer rapidement le diagnostic d’œsophagite à HSV1 avant même les résultats anatomopathologiques. Une mise sous traitement précoce par acyclovir a contribué à l’amélioration rapide des signes cliniques.

We have researched and identified Herpes viruses on the esophageal biopsies taken during the period between September 2006 and March 2008 for 15 suspected patients.

The esophageal biopsies were transferred to the laboratory being conserved in physiological serum and frozen at −80°C for PCR. A fragment was conserved for histopathological analysis. The specimen was defrozen and refrozen in liquid azote (to limit the inhibitors) and crushed to the powder form. Extraction was then done following the prerecognised protocol (Herpès Consensus Générique^® – “Argene”). That kit allows the amplification consensus of the viral genome of the most frequently encountered Herpes family virus: HSV1, HSV2, CMV, VZV, EBV and HHV6. The identification of the implicated virus was done by the Hybridowell Herpes Identification (Argene) kit in parallel with the migration of SDS gel of the obtained amplifications.

HSV1 was identified in seven esophageal biopsies between the 15 studied. HHV6 and the association HHV6/EBV for two patients and only one biopsy had inconclusive. The endoscopie and the histopathological examination had confirmed ulcerated esophagitis with cytopathogene aspect in favour of viral infection for six patients.

In absence of inhibitors, the adaptation of the extraction technique of the fragments of tissue for few millimetres and the amplifications by PCR had allowed rapid confirmation of the diagnosis of herpetic esophagitis secondary to HSV1 even before the results of the histopathological examination. Treatment by acyclovir entrained regression of the disease.