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Protéomique et hépatites auto-immunes : techniques et résultats - 20/11/08

Doi : 10.1016/j.immbio.2008.07.015 
E. Ballot a, , b, c , F. Le Naour d, S. Huguet a, b, c, F. Tahiri b, c, D. Samuel b, c, e, C. Johanet a, f, J.-C. Duclos-Vallee b, c, e
a Service immunologie et hématologie biologiques, hôpital Saint-Antoine, AP–HP, 184, rue du Faubourg-Saint-Antoine, 75012 Paris, France 
b Inserm, unité 785, 94800 Villejuif, France 
c UMR-S 785, université Paris-Sud, 94800 Villejuif, France 
d Inserm, unité 602, institut André-Lwoff, 94800 Villejuif, France 
e Centre hépatobiliaire, hôpital Paul-Brousse, AP–HP, Villejuif, France 
f UFR 967, faculté de médecine, université Pierre-et-Marie-Curie Paris-VI, 75005 Paris, France 

Auteur correspondant.

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Summary

Identification of autoantibodies targets is of importance for both physiopathology discussion and analytical research with the recent development of multiplexing system like Luminex® technology, built on flow cytometry or antigen biochip immunoassay. A new technique for antigen identification uses the proteomic analysis, which focuses on genes products, with their posttranslational modifications. Indeed, protein maturation can play an important role in epitopes generation. The purpose of this study is to review the main techniques for autoantigens identification, with a special development for the serological proteome analysis, combination of two-dimensional electrophoresis, immunoblotting assay, image analysis and mass spectrometry identification of interest immunoreactive spots. These techniques will be illustrated through identifications of the main autoantigens found in autoimmune hepatitis.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Résumé

Identifier la cible antigénique des autoanticorps est fondamentale, tant dans un cadre physiopathologique qu’analytique avec l’émergence dans le champ de la sérologie auto-immune de méthodes à « haut débit » à travers la technologie Luminex® ou les biopuces à antigènes. Un procédé récent d’identification de ces autoantigènes découle de l’analyse protéomique et permet d’appréhender les protéines telles qu’elles se présentent dans la cellule avec les modifications post-traductionnelles qui peuvent entrer dans la constitution des sites épitopiques. Cet article rapporte les différents moyens susceptibles d’être mis en œuvre pour identifier un autoantigène. Une importance particulière sera apportée à l’analyse sérologique du protéome, combinaison de l’électrophorèse bidimensionnelle, de l’immunoblot, d’une analyse d’image et enfin, d’une identification des antigènes cibles des autoanticorps par spectrométrie de masse. Ces différents procédés seront ensuite illustrés à travers l’identification des principaux autoantigènes rencontrés dans les hépatites auto-immunes.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Serologic proteome analysis, Mass spectrometry, Autoimmune disease, Autoimmune hepatitis, Autoantigen identification

Mots clés : Analyse sérologique du protéome, Spectrométrie de masse, Identification des autoantigènes, Maladie auto-immune, Hépatite auto-immune


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Vol 23 - N° 5

P. 289-310 - octobre 2008 Retour au numéro
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  • Evaluation and determination of reference intervals of the C-peptide assay on Elecsys 2010®
  • H. Neels, S. Cooreman, W. Durinx, E. Cuypers, W. Uyttenbroeck
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  • Evaluation of analytical performance of Advia® TnI ultra immunoassay and comparison with Access® AccuTnI™ method
  • C. Prontera, A. Fortunato, S. Storti, A. Mercuri, C. Boni, G.C. Zucchelli, M. Emdin, A. Clerico

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