La détermination de l’âge au moment du décès est un problème difficile en pratique médicolégale. L’étude de la vascularisation des sutures crâniennes constitue une approche originale, susceptible de témoigner du processus de synostose lié au vieillissement. Le dénombrement des sections de vaisseaux sur une préparation histologique de suture osseuse pose, cependant, un certain nombre de problèmes pratiques liés à la qualité de la préparation et à la méthode de quantification. La présente étude vise à illustrer l’apport potentiel d’une analyse automatique de lames virtuelles pour répondre à cette problématique.

La méthode d’analyse proposée est illustrée à partir de trois prélèvements de suture frontosphénoïdale dont les vaisseaux ont été révélés par une technique immunohistochimique, après décalcification des tissus osseux. Une image à haute résolution (objectif microscopique ×20 et résolution de 0,5μm) de chaque préparation microscopique a été acquise grâce à un dispositif de scannérisation microscopique. Le protocole d’analyse automatique de l’image mis en œuvre tire parti d’un traitement à deux résolutions différentes.

La stratégie adoptée garantit le repérage précis de la région d’intérêt, le dénombrement en un seul temps des sections vasculaires sur toute la préparation et le contrôle visuel des structures détectées.

L’estimation quantitative de la vascularisation d’une structure de grande taille, telle une suture crânienne, peut tirer bénéfice d’une numérisation et d’une analyse totalement automatique de lames virtuelles. L’analyse automatique exige cependant une préparation optimale des tissus ; la décalcification et la coloration immunohistochimique doivent être réalisées avec le plus grand soin.

Determining age at the time of death is a difficult problem in forensic practice. The study of the vascularization of cranial sutures is an original approach, which may mark the process of synostosis associated with aging. Counting sections of blood vessels on a histological section of cranial suture, raises however a number of practical problems related to the quality of the preparation and to the method of quantification. The purpose of this study is to illustrate the potential contribution of an automatic analysis of virtual slides to overcome these problems.

The proposed method of analysis is illustrated from three samples of frontosphenoidal suture whose vessels were immunostained after decalcification of bone tissue. A high resolution image (×20 objective and microscopic resolution of 0.5μm) of each microscopic preparation was acquired through a microscopic scanning device. The automatic image analysis protocol takes advantage of a processing of virtual slides at two resolutions.

The chosen strategy ensures the identification of the specific area of interest, the enumeration of blood vessel sections on the whole preparation and the visual control of the detected structures.

The quantitative estimate of the vascularization of a large structure, such as a cranial suture, can benefit from scanning and fully automatic processing of virtual slides. The automatic analysis requires however an optimal preparation of tissues; decalcification and immunohistochemical staining must be done with great care.