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Pro-apoptotic effect of chloroform fraction of Moraea sisyrinchium bulb against glioblastoma cells - 05/01/24

Doi : 10.1016/j.biopha.2023.115931 
Elham Einafshar a, b, Leila Mobasheri a, Maede Hasanpour c, d, Roghayeh Rashidi a, Ahmad Ghorbani b,
a Department of Pharmacology, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran 
b Pharmacological Research Center of Medicinal Plants, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran 
c Department of Pharmacognosy and Medicinal Plants Research Center, Faculty of Pharmacy, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran 
d Biotechnology Research Center, Pharmaceutical Technology Institute, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran 

Corresponding author.

Abstract

Introduction

Glioblastoma is a common malignant brain tumor, with limited therapeutic options. In our previous study, the Moraea sisyrinchium plant showed cytotoxicity against glioblastoma and hepatocellular carcinoma cells. Among different parts of this plant (flower, stem, and bulb), the bulb showed better anticancer potential. The present work aimed to test the anticancer activity of different fractions of the bulb extract, to determine its phytochemicals, and to study its mechanism action on glioblastoma.

Methods

The bulb extract was partitioned into different fractions using immiscible solvents. The U87 glioblastoma cells were incubated with the obtained fractions. Then, the cell proliferation assay (MTT), cell migration test (scratch), cell cycle analysis (propidium iodide staining), apoptosis/necrosis assay (annexin V/propidium iodide staining), and real-time PCR (PTEN, Akt, mTOR, BAX and BCL-2 genes) were performed. Phytochemicals were determined using liquid chromatography-mass spectroscopy.

Results

The chloroform fraction showed more antiproliferative effect than n-hexane, ethyl acetate, and n-butanol fractions. Also, chloroform fraction induced cell cycle arrest, increased apoptosis, and inhibited cell migration ability (P < 0.05). The expression of PTEN, mTOR, and BAX genes was significantly up-regulated, while the expression of Akt and Bcl-2 showed down-regulation. The phytochemicals identified in the chloroform fraction were mainly xanthones, phytosterols, and isoflavones.

Conclusion

The chloroform fraction of Moraea sisyrinchium bulb inhibits the proliferation and migration of glioblastoma cells by inducing cell cycle arrest and apoptosis by upregulation of the PTEN gene and Bax/Bcl-2 ratio. The identified compounds in the chloroform fraction are potential candidates for further investigation as anticancer agents against glioblastoma.

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Graphical Abstract




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Highlights

Different fractions (hexane, chloroform, ethyl acetate, etc.) were prepared from Moraea sisyrinchium.
Chloroform fraction showed more anticancer effects on glioblastoma cells than others.
This fraction induced cell cycle arrest, apoptosis, and cell migration inhibition.
Chloroform fraction upregulated PTEN gene expression and Bax/Bcl-2 ratio.

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Keywords : Apoptosis, Chloroform, Fraction, Glioblastoma, Moraea sisyrinchium


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