En toxicologie biologique ou médicolégale, en raison du très grand nombre de xénobiotiques à rechercher ou à doser, disposer de méthodes séparatives performantes est une nécessité absolue. Les méthodes chromatographiques, qu’elles soient gazeuses ou liquides, sont omniprésentes et couplées à des détecteurs de plus en plus performants. Mais, dans la très grande majorité des cas, et ce, malgré des détecteurs très spécifiques et sélectifs (spectrométrie en masse tandem ou de haute résolution), la séparation chromatographique demeure une nécessité. Les approches séparatives en phase gazeuse ou liquide permettent de résoudre la très grande majorité des besoins. Néanmoins, la séparation chromatographique de certaines molécules reste difficile. La résolution de ces problèmes de séparation nécessite parfois des développements longs et rarement satisfaisants. Encore peu employée dans nos laboratoires, la chromatographie en phase supercritique (SFC), qui utilise du dioxyde de carbone comme principal constituant de la phase mobile, ouvre de nouvelles possibilités séparatives. Contrairement à la chromatographie gazeuse, elle ne nécessite pratiquement plus d’étape de dérivatisation et autorise même l’injection directe de la phase organique d’extraction. La SFC a bénéficié depuis quelques années des mêmes progrès techniques que ceux apportés à la chromatographie liquide (pompes, injecteur) et de l’utilisation de colonnes de faible granulométrie (<2μm). Cet article a pour but de faire découvrir cette nouvelle approche analytique complémentaire aux autres méthodes séparatives sur un plan théorique et illustré de quelques exemples (x-MMC, quinine/quinidine, stéréo-isomères de la méthadone et de son métabolite l’EDDP).

In biological or forensic toxicology, due to the very large number of xenobiotics to be researched or assayed, having effective separation methods is an absolute necessity. Chromatographic methods, whether gaseous or liquid, are ubiquitous and coupled with increasingly efficient detectors. However, in the vast majority of cases, despite very specific and selective detectors (tandem or high-resolution mass spectrometry), chromatographic separation remains important. Separative approaches in the gaseous or liquid phase address the large majority of needs. Nevertheless, the chromatographic separation of some molecules remains difficult. The resolution of these separation problems sometimes requires long and rarely satisfactory developments. Still little used in our laboratories, supercritical phase chromatography (SFC), which uses carbon dioxide as the main constituent of the mobile phase, opens up new separation possibilities. Unlike gas chromatography, it rarely requires a derivatization step and even allows the direct injection of the organic extraction phase. SFC has benefited in recent years from the same technical progress as those brought to liquid chromatography (pumps, injector) and from the use of a small particle size column (<2μm). This article aims to provide a theoretical introduction to this new analytical approach, complementary to the other separative methods, and to describe some examples of applications (x-MMC, quinine/quinidine, stereoisomers of methadone and its metabolite EDDP).