The objective of the current study was to develop and validate the sensitive LC-MS methods for trace analysis of genotoxic impurities in Ivacaftor and Lumacaftor. The first method is for the trace analysis of 2,4-di-tert-butyl-5-nitrophenol in ivacaftor and the second method is for the trace analysis of 1-(2,2-difluoro-1,3-benzodioxol-5yl)-cyclopropane carboxylic acid and 3-carboxyphenyl boronic acid in lumacaftor.

High pure analytical grade solvents and reagents were used for this study. The chromatographic separation was performed on Luna C18 (250×4.6mm, 5.0μm) at a column temperature of 25°C using eluent consisting of acetonitrile and 0.1% v/v formic acid in water in a gradient elution mode. The eluent was run at a flow of 1.0mL/min and injection volume of 20μL.

The linearity, precision and accuracy of the developed methods was validated over the concentration range of 0.35–15.0ppm for 2,4-di-tert-butyl-5-nitrophenol, 0.30–15.0ppm for 1-(2,2-difluoro-1,3-benzodioxol-5yl)-cyclopropane carboxylic acid and 0.23–15.0ppm for 3-carboxyphenyl boronic acid. In both methods, interference was not observed at the retention time of analyte peaks. All the analytes were found to be stable in solution for a period of 48h.

The proposed methods are reliable, sensitive, precise, accurate, and robust for the trace level quantification of genotoxic impurities in Ivacaftor and Lumacaftor. These methods can be successfully implemented in the quality control lab for routine analysis.

L’objectif de la présente étude était de développer et de valider les méthodes LC-MS sensibles pour l’analyse des traces d’impuretés génotoxiques dans l’ivacaftor et le lumacaftor. La première méthode est pour l’analyse des traces de 2,4-di-tert-butyl-5-nitrophénol dans l’ivacaftor et la seconde méthode est pour l’analyse des traces de 1-(2,2-difluoro-1,3-benzodioxol-5yl l’acide)-cyclopropane carboxylique et l’acide 3-carboxyphényl boronique dans le lumacaftor.

Des solvants et des réactifs de haute pureté analytique ont été utilisés pour cette étude. La séparation chromatographique a été réalisée sur Luna C18 (250×4,6mm, 5,0μm) à une température de colonne de 25°C en utilisant un éluant composé d’acétonitrile et d’acide formique à 0,1 % v/v dans de l’eau en mode d’élution à gradient. L’éluant a été utilisé à un débit de 1,0mL/min et un volume d’injection de 20 uL.

La linéarité, la précision et l’exactitude des méthodes développées ont été validées sur la plage de concentration de 0,35 à 15,0ppm pour le 2,4-di-tert-butyl-5-nitrophénol, de 0,30 à 15,0ppm pour le 1-(2,2-difluoro-1 acide, 3-benzodioxol-5yl)-cyclopropane carboxylique et 0,23 à 15,0ppm pour l’acide 3-carboxyphényl boronique. Dans les deux méthodes, aucune interférence n’a été observée au temps de rétention des pics d’analyte. Tous les analytes se sont avérés stables en solution pendant une période de 48h.

Les méthodes proposées sont fiables, sensibles, précises, exactes et robustes pour la quantification à l’état de traces d’impuretés génotoxiques dans l’ivacaftor et le lumacaftor. Ces méthodes peuvent être mises en œuvre avec succès dans le laboratoire de contrôle qualité pour les analyses de routine.