Afin de faire des recherches sur le métabolisme et la prolifération du cancer du rein, nous avons mis en place un protocole de culture primaire de carcinome rénal à cellules claires (CRCC). L’objectif de notre protocole est de passer d’un tissu tumoral de patient, à des cellules cancéreuses cultivables en laboratoire.

Un fragment de la pièce de néphrectomie est récupéré au laboratoire d’anatomopathologie après examen macroscopique. Ensuite, il est découpé à la lame froide en morceaux de 1mm³ et transféré dans un milieu de dissociation chimique (libérase) pour séparer les cellules entre elles. La solution obtenue est filtrée, puis centrifugée pour culotter les cellules en suspension. Les cellules sont ainsi transférées dans des flasques avec un milieu de culture spécifique pour proliférer. Une fois la confluence des cellules obtenues, les cellules sont décollées à la trypsine puis passées dans une flasque plus grande. La culture était considérée comme un succès au bout de 3 passages.

Au total, nous avons inclus 18 patients dont l’imagerie était suspecte de carcinome rénal à cellules claires. Parmi ces 18 patients, 4 tumeurs n’étaient pas un carcinome rénal à cellules claires après résultat anatomopathologique et n’ont pas été conservées (2 oncocytomes, 1 angiomyolipome et 1 carcinome chromophobe). Les scores ISUP étaient tous représentés (1 ISUP 1, 5 ISUP 2, 4 ISUP 3 et 4 ISUP 4). Les tumeurs étaient majoritairement de stade TNMpT3 (7 tumeurs de stade T3, 2 tumeurs de stade T2 et 5 tumeurs de stade T1). Finalement, nous sommes parvenus à cultiver 10 lignées de carcinome rénal à cellules claires sur 14 patients. Les causes d’échec étaient majoritairement une absence précoce de prolifération des cellules dans les flasques et leur apoptose (Fig. 1, Tableau 1).

Nous sommes parvenu à isoler, cultiver et congeler 10 lignées de cellules cancéreuses de patients. Une analyse des cellules par immunohistochimie sera effectuée pour s’assurer de leur nature avant de commencer nos travaux de recherche dessus.