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The opioid peptide biphalin modulates human corneal epithelial wound healing in vitro - 31/10/21

Le peptide opioïde biphaline module la cicatrisation de l’épithélium cornéén humain in vitro

Doi : 10.1016/j.jfo.2020.09.007 
O.M. Gedar Totuk a, , 1 , E. Yildiz b , A. Mollica c , K. Kabadayi d , A. Sahin e
a Department of Ophthalmology, Bahçeşehir University School of Medicine, Istanbul, 34734, Turkey 
b Research Center for Translational Medicine, Koç University, Istanbul, 34010, Turkey 
c Department of Pharmacy, Università degli Studi G. d’Annunzio Chieti e Pescara, Chieti, 66100, Italy 
d Bahçeşehir University School of Medicine, Istanbul, 34734, Turkey 
e Department of Ophthalmology, Koc University Medical School, Istanbul, 34010, Turkey 

Corresponding author. Bahcesehir University School of Medicine, Department of Ophthalmology, Yenisahra Mah., Batman Sok. No:66-68 Sahrayicedit, Kadikoy Istanbul, 34374, Turkey.Bahcesehir University School of Medicine, Department of Ophthalmology, Yenisahra Mah., Batman Sok. No:66-68 Sahrayicedit, Kadikoy Istanbul34374Turkey

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Summary

Purpose

Analgesic drugs, including nonselective opioids and non-steroidal anti-inflammatory drugs, should be used with great precautions to relieve pain after trauma to the corneal epithelium because of their unfavorable effects on wound healing. Biphalin is a synthetic opioid peptide that has been demonstrated to possess a strong analgesic effect on rodents. The purpose of this study is to investigate the effects of biphalin on human corneal epithelial wound healing.

Methods

An immortalized human corneal epithelial cell (HCEC) culture was used to analyze the effects of biphalin on wound healing. The toxicity of biphalin at various concentrations was measured by the MTT assay. The effects of 1μM and 10μM biphalin on wound closure, cell migration and proliferation were tested in an in vitro scratch assay of HCECs. Naloxone, a non-selective competitive opioid receptor antagonist, was also used to inhibit the effects of biphalin in all experiments.

Results

Biphalin did not cause any toxic effect on HCECs at concentrations lower than 100μM at various incubation time points. Biphalin significantly increased wound healing at 1μM concentration in an in vitro scratch assay of HCECs (P<0.05). It also significantly increased migration of HCECs (P<0.01). There was no significant difference between the biphalin and control groups of HCECs in the Ki67 proliferation assay.

Conclusion

Biphalin, which is a synthetic opioid peptide, promotes corneal epithelial wound healing by increasing cell migration. This role should be evaluated in further in vivo and clinical studies.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Résumé

Objet

Les analgésiques, dont les morphiniques non-sélectifs et les anti-inflammatoires non stéroïdiens (AINS) devraient être utilisés avec beaucoup de précautions pour traiter la douleur dans les lésions de l’épithélium cornéen du fait de leurs effets indésirables sur la cicatrisation. La Biphaline est un peptide morphinique de synthèse dont on a démontré qu’il possède un effet analgésique puissant chez les rongeurs. Le but de cette étude est d’évaluer les effets de la Biphaline sur les lésions de l’épithélium cornéen humain.

Méthodes

Une culture de cellules épithéliales immortalisées de cornée humaine (HCEC) a été utilisée pour tester les effets de la Biphaline sur la cicatrisation. La toxicité de la Biphaline a été mesurée à diverses concentrations par essai MTT. L’effet de 1μM et de 10μM de Biphaline ont été testées sur la cicatrisation dans un essai in vitro de grattage de HCEC et séparément de migration et de prolifération cellulaire. La Naloxone, un antagoniste compétitif non sélectif des récepteurs morphiniques, fut aussi utilisée pour inhiber les effets de la Biphaline dans toutes les expériences.

Résultats

La Biphaline ne produit aucun effet toxique sur les HCEC aux concentrations inférieures à 100μM aux différents temps d’incubation. La Biphaline augmente significativement la cicatrisation à la concentration de 1μM dans un test de grattage in vitro d’HCEC (p<0,05). Elle accroît également significativement la migration des HCEC (p<0,01). Il n’y a pas de différence significative entre la Biphaline et le groupe témoin de HCEC au test de prolifération Ki67.

Conclusion

La Biphaline, un peptide morphinique de synthèse, favorise la cicatrisation de l’épithélium cornéen par l’augmentation de la migration cellulaire. Ce rôle serait à évaluer par des études in vivo et cliniques ultérieures.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Synthetic opioid peptide, Corneal wound healing, Opioid receptors, Human corneal epithelial cell culture

Mots clés : Peptide morphinique de synthèse, Cicatrisation cornéenne, Récepteurs morphiniques, Cultures de cellules épithéliales de cornée humaine

Abbreviations : BPE, DOR, DAPI, MTT, DMEM, EGF, FBS, GCPRs, HCECs, KOR, KSFM, MAP, MOR, NIH, PBS, OGFR, PKC, qRT-PCR, RWA


Plan


 This study was presented in part at 2nd International Cell Death Research Congress 2018, Izmir, Turkey, 1–4 November 2018, and published as congress proceedings MDPI Proceedings 2018,2(25),1552. https://doi.org/10.3390/proceedings2251552.


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