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Recombinant GII.P16 genotype challenges RT-PCR-based typing in region A of norovirus genome - 19/06/21

Doi : 10.1016/j.jinf.2021.04.015 
Floriana Bonura a, Noemi Urone a, Celestino Bonura a, Leonardo Mangiaracina a, Chiara Filizzolo a, Giuseppa Sciortino a, Giuseppa L. Sanfilippo a, Vito Martella b, Giovanni M. Giammanco a, , Simona De Grazia a
a Dipartimento di Promozione della Salute, Materno-Infantile, di Medicina Interna e Specialistica di Eccellenza “G. D'Alessandro”, Università di Palermo, Via del Vespro 133, Palermo I-90127, Italy 
b Dipartimento di Medicina Veterinaria, Università Aldo Moro di Bari, Valenzano, Italy 

Corresponding author.: Giovanni M. Giammanco, Present/permanent address: Via del Vespro 133, Palermo, I-90127, Phone: +39 0916553453

Highlights

In latest years GII.4[P16] and GII.2[P16] noroviruses have become predominant.
GII.P16 strains failed to be typed in polymerase region A with JV12A/JV13B primers.
Modified primer sets were tested to improve typing of the polymerase gene.
The use of degenerate primers increased the typing rate in region A in 2016–2019.
The plasticity of norovirus genomes requires continuous updates of typing primers.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Abstract

Objectives

In latest years GII.4[P16] and GII.2[P16] noroviruses have become predominant in some temporal/geographical settings. In parallel with the emergence of the GII.P16 polymerase type, norovirus surveillance activity in Italy experienced increasing difficulties in generating sequence data on the RNA polymerase genomic region A, using the widely adopted JV12A/JV13B primer set. Two sets of modified primers (Deg1 and Deg2) were tested in order to improve amplification and typing of the polymerase gene.

Methods

Amplification and typing performance of region A primers was assessed in RT-PCR on 452 GII norovirus positive samples obtained from 2194 stool samples collected in 2016–2019 from children hospitalized with acute gastroenteritis.

Results

The use of Deg1 increased the rate of samples types in region A from 49.5% to 81.4% and from 21.9% to 69.7% in 2016 and 2017, respectively. The rate of Deg1 typed samples remained high in 2018 (90.1%), but sharply decreased to 11.8% in 2019. The second primers set, Deg2, was able to increase to 64.9% the rate of 2019 samples typed in region A, while typing efficiently 73.2%, 69%, and 86.4% of samples collected in 2016, 2017 and 2018, respectively.

Conclusions

The plasticity of norovirus genomes requires continuous updates of the primers used for strain characterization.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Norovirus, GII.P16, Typing, Polymerase, Degenerate primers


Plan


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Vol 83 - N° 1

P. 69-75 - juillet 2021 Retour au numéro
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