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DÉTERMINATION DE L’HÉMOGLOBINE PLASMATIQUE ET ÉVALUATION SPECTROPHOTOMÉTRIQUE DE L’HÉMOLYSE EN BIOCHIMIE CLINIQUE - 31/03/08

Doi : RFL-11-2006-00-386-50834-101019-200601444 

Hicham Mezzour [1],

Anis Belhaj Khelifa [1],

Fadoua Neffati [1],

Wahiba Douki [1],

Adel Ben Amor [1],

Mohamed Fadhel Najjar [1]

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La mesure de l’hémoglobine plasmatique est utilisée dans l’évaluation de divers phénomènes hémolytiques, particulièrement au moment du prélèvement. En outre, les méthodes employées pour quantifier l’hémoglobinémie, paramètre d’un grand intérêt en chirurgie cardiaque, doivent être très précises, du fait des concentrations mesurées plus basses dans le plasma que dans le sang total. Le but de ce travail est d’illustrer les avantages d’une technique d’exploration spectrale pour la détermination directe de l’hémoglobine plasmatique.

La méthode spectrale étudiée est linéaire, précise, de sensibilité appropriée pour l’usage clinique et n’est pas affectée par la présence ni de la bilirubine, ni des triglycérides.

La corrélation a été évaluée avec une méthode spectrophotométrique en utilisant la 3,3’,5,5’-téraméthylbenzidine (TMB), un réactif non cancérogène. La réaction de l’hémoglobine avec la TMB a été étudiée avec un spectrophotomètre UV-Visible Hitachi U-2000. La méthode est précise (CV ≪ 1,00 %), exacte (CE ≪ 5,00 %) et montre un excellent taux de recouvrement de l’hémolyse (R > 0,95). Les coefficients de variation pour l’analyse manuelle sont inférieurs à 1 %.

Determination of plasmatic haemoglobin and spectrophotometric evaluation of haemolysis in clinical biochemistry

The measurement of plasma haemoglobin is utilized in the evaluation of various haemolytic phenomenons, especially at the time of sampling. Besides, the methods used to titrate plasmatic haemoglobin, an analysis which is of great interest to cardiac surgery, must be very accurate, because plasmatic levels are much lower than those found in whole blood. The purpose of this report is to illustrate the advantages of a direct spectrophotometric scanning technique for determination of plasma haemoglobin.

The scanning method demonstrates linearity, precision, and sensitivity suitable for clinical use and not affected by the presence of Bilirubin, nor triglycerides.

The correlation was assessed with a spectrophotometric method using the 3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine (TMB), a non carcinogenic reagent. The reaction of haemoglobin with TMB was studied with a Hitachi U-2000 UV-Visible spectrometer. The method was precise (CV ≪ 1,00%), accurate (CE ≪ 5,00%) and showed excellent recovery of haemolysis (R > 0,95). The CV for the manual assay was less than 1%.


Mots clés : Hémoglobine , dosage , hémolyse , évaluation

Keywords: Haemoglobin , determination , haemolysis , estimation


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Vol 36 - N° 386

P. 59-64 - novembre 2006 Retour au numéro
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