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Intérêt de la numération des cellules souches CD34+ comme indicateur prédictif de l’amplification des Cellules Stromales Mésenchymateuses dérivées de moelle osseuse - 22/08/19

Doi : 10.1016/j.tracli.2019.06.151 
Andreas Giraud, Anne-Gaele Chartois , Philippe Simon, Thomas Zuliani, Gaetane Rouvray, Frédéric Dehaut
 EFS Centre Pays de la Loire – Atlantic BIO GMP, St Herblain, France 

Auteur correspondant.

Résumé

Des productions de Cellules Stromales Mésenchymateuses (CSM) sont réalisées, sur Atlantic BIO GMP, à partir de moelle osseuse (MO). La présence en très faible quantité des cellules d’intérêt ainsi que l’absence de marqueurs spécifiques rendent impossible leur quantification dans la MO. La quantité de cellules ensemencées est, à ce jour, définie à partir de la numération des leucocytes réalisée sur un automate d’hématologie (AH). Certaines productions n’ont pu être libérées car la quantité de CSM en fin de culture était insuffisante. Les contrôles de la MO intègrent une numération des cellules souches hématopoïétiques par cytométrie en flux après marquage CD45 et CD34 ainsi qu’une formule manuelle sur frottis. Les premiers Résultats suggèrent l’existence d’une corrélation entre la concentration de cellules CD34+ dans la MO et la quantité de CSM obtenue en fin de production. Nous avons constaté une meilleure amplification des CSM sur les prélèvements de MO riches en cellules CD34+ tandis que les lots non-conformes étaient plus souvent issus de MO pauvres en CD34+ et/ou hémodiluées. On observe également une différence entre le nombre de leucocytes numérés par l’AH et le nombre de cellules CD45+, explicable par la présence d’érythroblastes CD45− et comptés parmi les leucocytes car nucléées. Le pourcentage d’érythroblastes est un indicateur de la qualité de la MO, un pourcentage inférieur à 10 % suggérant une hémodilution du prélèvement. Les essais se poursuivent afin de confirmer, sur plus de données, l’intérêt du CD34 comme indicateur prédictif de la production de CSM et de définir éventuellement une valeur seuil permettant de décider ou non du lancement d’une production de CSM.

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Vol 26 - N° 3S

P. S79 - septembre 2019 Retour au numéro
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