Pseudomonas aeruginosa possède des facteurs de virulence, dont le système de sécrétion de type III (SSTT). Il permet à la bactérie d'exporter directement dans le cytoplasme d'une cellule-cible des toxines protéiques. Certaines souches sont capables d'induire la nécrose des polynucléaires neutrophiles (PNN) ; ce phénomène est dépendant du SSTT.

Afin de le préciser, 5000 mutants d'une souche cytotoxique par insertion aléatoire avaient été générés, puis criblés ; 60 d'entre eux avaient perdu ce phénotype. Devant la proportion (12/60) de mutants touchés dans l'un des gènes des sous-unités E1 ou E2 de la pyruvate déhydrogénase (PDH), l'effet de ces mutations a été exploré.

La sécrétion de protéines par le SSTT est plus faible chez ces mutants PDH. Le promoteur pC régule la synthèse du facteur d'activation des gènes du SSTT, ExsA ; l'activation transcriptionnelle dont pC est l'objet chez la souche sauvage lors de l'activation du SSTT est absente chez les mutants PDH. Après complémentation en trans par ExsA, la cytotoxicité des mutants PDH vis-à-vis des PNN augmente, ainsi que la quantité de protéines sécrétées par le SSTT. Des expériences de gel retard avec le promoteur pC montrent que les mutants PDH contiennent plus d'activation de fixation de pC que la souche sauvage. Cela suggère une répression de pC, expliquant la faible cytotoxicité. Une purification de cette activité de fixation a identifié la leucine aminopeptidase (PhpA) comme probablement responsable de cette activité de fixation, et donc comme répresseur potentiel de pC. Le lien avec la PDH n'est pas connu.

Pseudomonas aeruginosa type III secretion system (TTSS) is a virulence factor, which allows bacteria to inject toxins within the cytoplasm of eukaryote cells. Some P. aeruginosa strains induce polymorphonuclear neutrophile (PMN) necrosis. This phenotype is type-III-dependant. 5000 mutants from a random mutagenesis of a cytotoxic strain were created. 60 of these mutants had lost the capacity to induce PMN necrosis. We found a high proportion (12/60) of mutations within the pyruvate dehydrogenase (PDH) genes (subunits E1 and E2). We then determined more precisely the consequences of these mutations. We determined that the PDH mutants secrete fewer proteins by TTSS than the wild strain. The promoter pC regulates the synthesis of the global transcriptional factor of the type III secretion system genes, ExsA. In the wild strain, TTSS activation is associated with a transcriptional activation of pC, which is not observed in PDH mutants. PDH mutants in trans complementation by exsA increase their ability to induce PMN necrosis and to secrete proteins using SSTT. Gel mobility shift analysis of the promoter pC shows that PDH mutants contain more pC-binding activity than the wild strain. This suggests that this binding activity is responsible for the repression of transcriptional activation. This repression excess would be the reason for a lesser cytotoxicity of our PDH mutants on PMN. After purification, this binding factor was identified as the leucin aminopeptidase, PhpA. The PhpA-PDH interactions are not documented.