La biotine (Biot) est une alternative aux sondes radioactives pour tracer les cellules sanguines. Elle permet de suivre simultanément in vivo plusieurs populations de cellules marquées à différentes densités de Biot. Une seule étude décrit le suivi d’une population de Biot-plaquettes (PLTs) chez l’homme (Stohlawetz, 1999).

Il s’agit de marquer des PLTs humaines avec différents niveaux de Biot afin de déterminer si la biotinylation affecte leurs fonctions. C’est une étude préliminaire pour explorer la faisabilité de produire des Biot-PLT multi-marquées pour des études cliniques.

Les PLTs en Tyrode's albumine (TA) sont incubées avec de la sulfo-NHS-Biot (0, 4,5, 45 et 180μM), lavées 2 fois et resuspendues en TA/PPPcit (v/v). La densité de Biot est contrôlée en cytométrie en flux (CF) avec la streptavidine-PE et les fonctions des PLTs évaluées sur les critères de sécrétion, intégrité des glycoprotéines (GP) et agrégation.

Les populations de Biot-PLTs sont distinguées en CF. L’externalisation de la P-sélectine après activation au TRAP est stable de 0 à 45μM de Biot et un peu diminuée pour 180μM. L’expression de GPIb et GPIIbIIIa est normale pour toutes les Biot-PLTs. L’agrégabilité à l’acide arachidonique (AA) est préservée pour toutes les Biot-PLTs. La Biot diminue la réponse à l’ADP et au collagène de façon dose dépendante avec une agrégation des Biot180-PLTs abolie avec l’ADP (Tableau 1).

Les principales fonctions plaquettaires : sécrétion, intégrité des GP et agrégation en réponse à l’agoniste fort l’AA, sont pleinement conservées pour toutes les densités de Biot. Mais la biotinylation affecte la réponse à l’ADP et au collagène. Le multi-marquage à la Biot serait approprié pour repérer les PLTs lors d’études cliniques pourvues que des concentrations de Biot<45μM soient utilisées si la fonction des PLT est critique. Cette approche est précieuse pour évaluer de nouveaux produits et répond au besoin de sondes non radioactives.