L'expression des récepteurs d'adhérence du polynucléaire neutrophile (PNN) varie avec l'état d'activation leucocytaire. Leur quantification nécessite une méthode précise, reproductible, n'entraînant pas d'activation artéfactuelle.

Le but de ce travail a été d'étudier l'influence de la préparation cellulaire sur la détermination des récepteurs d'adhérence du polynucléaire neutrophile.

Il est proposé de quantifier, à l'aide d'un calibrateur de l'immuno-marquage (QIFIKIT^®, Dako), l'expression des principales molécules d'adhérence (L-sélectine et b₂ intégrines) à la surface de PNN préparés selon trois méthodes : PNN analysés en sang total recueilli en présence d'EDTA ; PNN isolés par le gradient de densité Polymorphprep™ 1,113 (Nycomed Pharma) ; et PNN fixés par le formaldéhyde, à partir de sang prélevé en présence d'EDTA.

Il a été noté une diminution de l'ensemble des marqueurs analysés après isolement et après fixation au formaldéhyde par rapport à l'analyse des PNN en sang total. Ces résultats vont à l'encontre des données de la littérature qui notent la présence d'un phénotype d'activation (augmentation de l'expression des b₂ intégrines) après utilisation d'autres procédés d'isolement ou de fixation.

Ce travail représente un exemple de variation biologique en fonction d'un paramètre pré-analytique. Il rappelle la nécessité de prendre en compte, lors de l'interprétation d'un résultat biologique, l'ensemble des paramètres pré-analytiques et analytiques. Il souligne l'intérêt de mettre en oeuvre des pratiques consensuelles lors de la détermination de ces facteurs afin de pouvoir intégrer les résultats dans des démarches comparatives multicentriques et/ou longitudinales.

Polymorphonuclear neutrophil (PMN) adherence receptors expression varies with leukocyte activation state. Their quantification need accurate and inter-laboratories reproducible methods, without artefactual activation.

The aim of this study was to study the influence of cell preparation on PMN adherence receptors expression.

It was proposed to quantify, using immunolabeling standard (QIFIKIT^®, Dako), surface expression of the main adherence receptors (L-selectin and b₂ integrins), from different preparations of PMN: total blood collected with EDTA, isolated PMN by density gradient Polymorphprep ^TM 1,113 (Nycomed Pharma) and formaldehyde fixed PMN.

A decrease of all receptors was noted after isolation and fixation of PMN, in comparison with whole blood PMN analysis. These results differed from data previously reported since, in these studies, activated phenotypes (increased of b₂ integrins) were observed after isolation and fixation methods.

The present study provides strong evidence that pre-analytical conditions are sources of biological variations and thus extreme care must be taken in the interpretation of results. It underlines the interest of consensual practices for these pre-analytic and analytic parameters in order to compare results in multicenter and longitudinal studies.