Analyse protéïque de la réponse au TGF-? des fibroblastes dermiques humains dans la sclérodermie systémique - 23/11/17
, G. Clary 2, M. Le Gall 1, N. Dumoitier 3, S. Lofek 4, P. Chafey 2, P. Moinzadeh 5, T. Krieg 5, C. Denton 6, L. Mouthon 7Résumé |
Introduction |
La sclérodermie systémique (ScS) est une maladie auto-immune rare caractérisée par une auto-immunité, une vasculopathie et de la fibrose. La fibrose est due à une activation exagérée des fibroblastes par le facteur de croissance TGF-β. Nous avons ici étudié la réponse protéique de fibroblastes dermiques de patients atteints de ScS après stimulation par le TGF-β.
Matériels et méthodes |
Des fibroblastes cutanés de 4 patients atteints de ScS et de 3 sujets sains ont été cultivés en présence ou en absence de TGF-β. L’électrophorèse en gel bidimensionnel et la spectrométrie de masse (MS) ont été utilisées pour identifier les protéines différemment exprimées entre les groupes. Les logiciels Ingenuity Pathway Analysis® (IPA) et Panther® ont été utilisés pour analyser les protéines identifiées. Enfin, l’analyseur de cellules en temps réel xCelligence® (RTCA) a été utilisé pour évaluer la prolifération et la viabilité des fibroblastes afin de valider les protéines d’intérêt identifiées préalablement.
Résultats |
Nous avons identifié 279 taches protéiques différemment exprimées entre les groupes. L’analyse en composantes principales a révélé des différences significatives entre les fibroblastes chez les patients atteints de ScS et HC lorsqu’ils ont été cultivés en présence ou en absence de TGF-β. Le logiciel IPA® a révélé des processus spécifiques protéiques tels que l’implication dans l’organisation du cytosquelette, la formation d’actine, la signalisation des intégrines, le remodelage cellulaire et les jonctions intercellulaires. Le logiciel Panther® a révélé des processus biologiques différentiels tels que les processus cellulaires, les processus métaboliques et l’organisation des composants cellulaires. Le TGF-β a augmenté la synthèse des protéines des fibroblastes impliquées dans le cytosquelette, la formation d’actine et la signalisation des intégrines. En utilisant IPA et RTCA, nous avons identifié et validé la participation du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) et de la phosphatidylinositol 3 kinase (Pi3K) dans la prolifération et la viabilité des fibroblastes chez les patients atteints de ScS.
Conclusion |
Nous avons confirmé que le profil de protéome des fibroblastes diffère entre les patients atteints de ScS et les sujets sains et démontré que les fibroblastes augmentent leur protéome lors de la stimulation par le TGF-β. Nous avons finalement mis en évidence EGFR et Pi3K comme protéines d’intérêt des fibroblastes de patients atteints de ScS et pourraient être considérées comme de potentielles cibles pour inhiber la fibrose dans la ScS.
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Vol 38 - N° S2
P. A52-A53 - décembre 2017 Retour au numéro
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