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Quick and cheap MIRU-VNTR typing of Mycobacterium tuberculosis species complex using duplex PCR - 20/04/17

Doi : 10.1016/j.tube.2016.10.003 
Memona Yasmin a, b, Stéphanie Le Moullec c, Rubina Tabassum Siddiqui a, Jessica De Beer d, Christophe Sola c, Guislaine Refrégier c,
a Health Biotechnology Division, National Institute for Biotechnology and Genetic Engineering (NIBGE), P.O. Box# 577, Jhang Road, Faisalabad, Pakistan 
b Pakistan Institute of Engineering and Applied Sciences (PIEAS), Nilore, Islamabad, Pakistan 
c Institute for Integrative Biology of the Cell (I2BC), CEA, CNRS, Univ. Paris-Sud, Université Paris-Saclay, 91198, Gif-sur-Yvette Cedex, France 
d National Tuberculosis Reference Laboratory, National Institute for Public Health and the Environment (RIVM), Bilthoven, The Netherlands 

Corresponding author. I2BC, Bat 400, 91405, Orsay Cedex, France.I2BCBat 400Orsay Cedex91405France

Abstract

While minisatellites are usually typed using capillary sequencers or qiaplex systems in developed countries, many low-resource regions cannot afford it. We propose an optimized agarose gel electrophoresis method to genotype Mycobacterium tuberculosis species complex minisatellites in their standardized format (24 MIRU-VNTR). It is based on duplex PCRs combining VNTR loci harboring distinct amplicon sizes whatever the repetition number of each locus. This method performs well both on DNA extracts of good quality and on thermolysates while reducing workload and reagents costs.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : MLVA, Multiplexing, Genotyping


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Vol 101

P. 160-163 - décembre 2016 Retour au numéro
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