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Le Calicivirus félin non enveloppé est inactivé efficacement par l’amustaline/GSH dans les concentrés de globules rouges - 03/11/16

Doi : 10.1016/j.tracli.2016.08.112 
J.-M. Payrat , Felicia Santa Maria, Andrew Laughhunn, Raymond Lenhoff, Adonis Stassinopoulos
 Cerus Corporation, Concord, États-Unis 

Auteur correspondant.

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Résumé

Introduction

Intercept™ Blood System pour les globules rouges (non approuvé commercialement) utilise une petite molécule d’amustaline pour former des adduits covalents au sein des acides nucléiques des leucocytes et des agents pathogènes contaminants pour empêcher leur réplication. Avant incubation de 18–24h à température ambiante, 0,2mM d’amustaline et 20mM de glutathion (GSH) sont ajoutés. L’inactivation est complète au bout de 3h. Le temps supplémentaire assure une décomposition complète de l’amustaline. Une centrifugation et l’échange du surnageant avec une solution additive (SAG-M) fournissent un concentré de globules rouges (CGR) inactivé. L’objectif de cette étude était d’évaluer l’inactivation du Calicivirus félin (CVF) pour des CGR en Optisol (AS-5). CVF est un virus à ARN simple brin sens positif, genre Vesivirus, famille Caliciviridae et sert de modèle pour les petits virus non enveloppés tels que le virus de l’hépatite E.

Méthodes

Pour chaque expérience, un CGR a été contaminé avec du CVF à une concentration finale de ∼108,0pfu/mL. Les CGR contaminés ont été mélangés avec le GSH et des échantillons de contrôle (T=0) pris pour déterminer les titres pré-amustaline. L’amustaline a été mélangée aux CGR et des échantillons tests (T=3) ont été prélevés pour déterminer les niveaux d’inactivation. Les échantillons contrôles et tests ont été dilués en série et inoculés sur des cellules CrFK. Les plaques ont été incubées 3jours à 37°C, colorées avec du cristal violet avant numération. La réduction Log a été calculée sur base de la différence entre le titre moyen dans des échantillons pré et post-amustaline à 3h.

Résultats

Une inactivation robuste de CVF a été obtenue comme résumé dans le Tableau 1.

Conclusion

Le Calicivirus félin non enveloppé a été inactivé à la limite de détection dans les CGR après traitement avec le GSH et l’amustaline. Une inactivation de>5,8 log de CVF a été obtenue dans le modèle d’infectivité CrFK.

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Vol 23 - N° 4

P. 306-307 - novembre 2016 Retour au numéro
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