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Comparison of the sensititre yeastone colorimetric method with the nccls broth microdilution modified reference method for amphotericin B, fluconazole, itraconazole and voriconazole susceptibility testing against candida non-albicans species - 04/03/08

Doi : JMM-12-2003-13-4-1156-5233-101019-ART2 

M. Watelle [1],

D. Swinne [1],

M. Van Der Flaes [1],

N. Nolard [1]

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Objective

A comparative evaluation of the commercial Sensititre YeastOne colorimetric method with an adapted NCCLS M27-A reference microdilution method was performed for antifungal susceptibility testing of 92 non- albicans yeast isolates of the BCCM/IHEM collection against amphotericin B, fluconazole, itraconazole and voriconazole.

Material and methods

The following clinical blood isolates were tested: 47 Candida glabrata , 25 Candida parapsilosis , 6 Candida tropicalis , 4 Candida krusei , 1 Candida guilliermondii , 2 Candida lusitaniae , 3 Pichia anomala and 4 Saccharomyces cerevisiae .

The Sensititre YeastOne panel was performed according to the manufacturer's instructions. For this colorimetric method, MICs (minimum inhibitory concentration) were determined visually after 24 hours. For the NCCLS reference method, MICs were read spectrophotometrically after 48 hours of incubation.

Results and conclusion

The overall agreement within 2 dilutions (MIC ± 1 dilution) by both methods was calculated against the four antifungal agents. This agreement was 72.8, 85.9, 59.8 and 74.4% for amphotericin B, fluconazole, itraconazole and voriconazole, respectively.

The main discrepancy between the YeastOne and the NCCLS microdilution method consisted of higher itraconazole MICs for Candida glabrata species, observed with the YeastOne method.

For all the tested isolates, no major differences regarding susceptibility categories, were observed.

This study demonstrates that YeastOne method can be a useful method for antifungal susceptibility testing in routine clinical laboratories.

Comparaison entre la méthode colorimétrique Sensititre YeastOne et la méthode de référence NCCLS modifiée pour la détermination de la sensibilité de Candida non-albicans à l'amphotéricine B, au fluconazole, à l'itraconazole et au voriconazole

Objectif

La méthode colorimétrique commerciale Sensititre YeastOne a été comparée à une méthode NCCLS M27-A adaptée (version microdilution) pour tester la sensibilité de 92 souches de levures non- albicans de la collection BCCM/IHEM vis-à-vis de l'amphotéricine B, du fluconazole, de l'itraconazole et du voriconazole.

Matériel et méthode

Les souches isolées de cas de fongémies appartiennent aux espèces suivantes: Candida glabrata (47), Candida parapsilosis (25), Candida tropicalis [6], Candida krusei [4], Candida guilliermondii [1], Candida lusitaniae [2], Pichia anomala [3]and Saccharomyces cerevisiae [4].

La trousse commerciale Sensititre YeastOne a été utilisée selon les recommandations de la firme. La lecture des résultats a été effectuée visuellement après 24 heures d'incubation.

La méthode originale de référence NCCLS a été modifiée comme suit: 2 % de glucose ajouté au milieu, utilisation de microplaques à fond plat et lecture réalisée à l'aide d'un spectrophotomètre après 48 heures d'incubation.

Résultats et conclusion

La concordance dans un intervalle de 2 dilutions (CMI ± 1 dilution) a été calculée pour chacun des 4 antifongiques. Elle atteint 72.8, 85.9, 59.8 et 74.4 % pour respectivement l'amphotericine B, le fluconazole, l'itraconazole et le voriconazole. Les discordances majeures entre les 2 méthodes concernent des valeurs de CMI vis-à-vis de l'itraconazole, plus élevées avec Sensititre YeastOne qu'avec la méthode NCCLS de référence pour les souches de Candida glabrata . Aucune différence majeure relative aux profils de sensibilité n'a par contre été relevée pour aucune des souches étudiées.

Cette étude démontre que la méthode YeastOne est une alternative utile et appropriée pour tester la sensibilité aux antifongiques dans des laboratoires cliniques de routine.

Keywords: Susceptibility testing , Candida non- albicans spp , Sensititre YeastOne , NCCLS microdilution method

Keywords: Sensibilité in vitro , Candida non- albicans sp , Sensititre YeastOne , NCCLS méthode de microdilution


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Vol 13 - N° 4

P. 168-173 - décembre 2003 Retour au numéro
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