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Quantification of DNA damage by the analysis of silver stained comet assay images - 21/10/15

Doi : 10.1016/j.irbm.2015.09.006 
G. Sreelatha a, , 1 , A. Muraleedharan b, P.S. Sathidevi a, P. Chand b, R.P. Rajkumar c
a Dept. of Electronics & Communication Engineering, National Institute of Technology Calicut, 673 601 Kerala, India 
b Dept. of Anatomy, Jawaharlal Institute of Postgraduate Medical Education & Research, Puducherry, India 
c Dept. of Psychiatry, Jawaharlal Institute of Postgraduate Medical Education & Research, Puducherry, India 

Corresponding author.

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Abstract

1. Objectives

The main objective is to develop a fully automated system for Deoxyribo Nucleic Acid (DNA) damage analysis using silver stained comet assay images for clinical applications.

2. Materials and methods

Silver stained comet assay images of lymphocytes obtained from confirmed cases of Schizophrenia were employed for DNA damage analysis using Single Cell Gel Electrophoresis (SCGE) or Comet assay. The image analysis consists of three stages: (1) Comet segmentation by incorporating shading correction, pre-processing stages for image enhancement, noise filtering and thresholding; (2) Comet partitioning by fuzzy clustering and (3) Comet quantification stage in which the limitations of fuzzy clustering are eliminated.

3. Results

This study involves 40 cases of Schizophrenia. Results of the proposed method are compared with those of OpenComet and CometScore software. Comet segmentation result is validated with a confusion matrix which shows better values for all performance indices. The proposed technique gave 87.12% Positive Predictive Value (PPV) and 90.16% sensitivity. It shows a large improvement in PPV and sensitivity, over the most recent competitive method, OpenComet. Regression analysis is carried out to validate the quantification results. Visual scores evaluated by the expert and DNA (%) in tail are used for finding the coefficient of determination,   statistic. The proposed method gives a better   value of 0.9. The performance of the proposed method is evaluated by a clinical expert.

4. Conclusion

The proposed method is found to be very efficient for DNA damage analysis of silver stained comet assay images in the area of clinical research.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : DNA damage analysis, Silver stained comet assay images, Comet segmentation, Comet partitioning, Fuzzy clustering


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Vol 36 - N° 5

P. 306-314 - octobre 2015 Retour au numéro
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