The karyotype of the threatened ant species Atta robusta is described so as to establish the evolutionary relationships of this taxon with other leafcutter ants. Standard Giemsa staining, C-banding, NOR banding, fluorochromes CMA₃/DAPI, Hsc-FA technique and Fluorescence in situ Hybridization (FISH) using 18S rDNA probe were conducted on a population from Aracruz, state of Espírito Santo, Brazil, allowing for comparisons with data available on Atta and other fungus-growing ant species. The diploid chromosome number observed for A. robusta was 2n=22, and the karyotypic formula was 18m+2sm+2st. Heterochromatic blocks were observed in the centromeric region of most chromosomes, where one pair of metacentric chromosomes is characterized by a GC-rich heterochromatic band in the interstitial region of its long arm. The detection of 18S rDNA using FISH confirmed the presence of single NOR for A. robusta. This is the first report of rDNA 18S detection using FISH for leafcutter ants. The cytogenetic results of this study confirm the information available for Atta and allow us to confirm the conserved chromosome number, morphology and banding pattern within the genus for the taxa studied to date, which included species from three out of the four groups of Atta indicated by molecular data. The accumulation of cytogenetic data on fungus-growing ants enhances the understanding of the genomic evolutionary patterns of Atta, since it belongs to a group of recent origin between the most well studied ants. Cytogenetic data does not indicate restrictions in relocation or reintroduction in areas where populations were extinct due to the conserved karyotype. This study allows for cytogenetic comparison of A. robusta with other ants of Atta, emphasizing the importance of chromosomal information for species conservation.

Le caryotype de la fourmi Atta robusta, menacée d’extinction, a été décrit dans le but d’établir les relations évolutives de ce taxon avec les autres fourmis coupeuses de feuilles. La coloration au Giemsa, bande C, bande NOR, fluorochromes CMA₃/DAPI, la technique Hsc-FA et l’hybridation fluorescente in situ (FISH) utilisant une sonde de l’ADN ribosomique 18S ont été mises en œuvre sur une population d’Aracruz, État du Espírito Santo, au Brésil, permettant des comparaisons avec les données disponibles sur Atta et d’autres espèces de fourmis cultivatrices de champignons. Le nombre de chromosomes diploïdes observés pour A. robusta était 2n=22 et la formule chromosomique 18m+2sm+2st. Des blocs hétérochromatiques ont été rencontrés dans la région centromérique de la plupart des chromosomes, où une paire de chromosomes métacentriques se caractérise par une bande hétérochromatique riche en GC dans la région interstitielle de son bras long. La détection d’ADNr 18S utilisant la technique du FISH a confirmé la présence d’une unique paire de NOR pour A. robusta. Les résultats cytogénétiques de cette étude confirment l’information disponible pour Atta ainsi que la conservation du nombre de chromosomes, la morphologie et le modèle de bande dans le genre pour les taxons déjà étudiés jusqu’à présent, et qui concerne des espèces de trois des quatre groupes d’Atta suggérés par les données moléculaires. En raison de ce caryotype conservé, les données cytogénétiques ne présentent aucune restriction quant à la relocalisation ou la réintroduction de l’espèce dans les zones où les populations ont été éteintes. L’accumulation de données cytogénétiques sur les espèces de fourmis cultivatrices de champignons contribue ainsi à la compréhension des tendances évolutives génomiques dans le genre Atta, car il appartient à un groupe d’origine récente parmi toutes les fourmis les plus étudiées. Cette étude a permis la comparaison cytogénétique de A. robusta avec d’autres fourmis du genre Atta, soulignant l’importance de l’information chromosomique pour la conservation des espèces.