La quasi-totalité des patients allergiques au pollen de bouleau présente des IgE dirigées contre l’allergène Bet v 1, la majorité réagissant exclusivement contre cet allergène pertinent. Dans ce contexte, nous avons produit et formulé l’allergène Bet v 1.0101 recombinant (rBet v 1) sous forme de comprimés, à des fins d’immunothérapie allergénique.

L’allergène rBet v 1 exprimé dans Escherichia coli à l’échelle 1500 L a été caractérisé par chromatographie liquide, spectrométrie de masse (MS) et diffraction aux rayons X. Cet allergène de qualité pharmaceutique (BPF) a ensuite été évalué lors d’une étude clinique de phase II multicentrique, randomisée, en double aveugle, contrôlée contre placebo, conduite sur une cohorte de 483 patients européens souffrant de rhino-conjonctivite allergique au pollen de bouleau.

L’intégralité de la séquence de rBet v 1 a été confirmée en MS/MS. Néanmoins, la détection en MS de formes non-matures et de substitutions d’acides aminés a nécessité des optimisations successives des conditions de cultures cellulaires afin de réduire la concentration de ces impuretés. Le procédé de purification a été modifié de façon à exclure des protéines de la cellule hôte identifiées en MS. Ce procédé a également été optimisé afin d’éliminer un métabolite d’E. coli piégé dans la cavité hydrophobe de Bet v 1. De plus, nous avons adapté les conditions de stockage de l’allergène afin de limiter son oxydation. Finalement, l’évaluation clinique a démontré que rBet v 1 administré par voie sublinguale présente une innocuité et une efficacité similaires à celles observées avec un extrait de pollen de bouleau.

Nous avons produit l’allergène rBet v 1 de qualité pharmaceutique à l’échelle industrielle. La caractérisation structurale détaillée a été décisive afin d’accompagner les développements et optimisations des procédés d’expression et de purification de cette molécule. Une formulation en comprimés a permis de réaliser la première étude clinique de phase II par voie sublinguale avec un allergène recombinant et de confirmer sa bonne tolérance et son efficacité pour les patients souffrant d’une rhino-conjonctivite allergique au pollen de bouleau.